吊兰硝酸盐转运蛋白编码基因的克隆及功能分析

发布时间：2024-05-29 01:19

　　硝酸盐转运蛋白(nitrate transporter,NRT)在植物从土壤里吸收利用硝酸盐的过程中起着至关重要的作用。已有报道表明,硝酸盐转运蛋白基因的过量表达可显著提高作物的氮素利用效率和产量。因此,从特殊生物资源中克隆硝酸盐转运蛋白基因,对利用生物工程等技术大幅度提高作物的氮素利用效率,提高农作物产量,增强植物营养抗病性,减少因氮素过量施用而造成的环境污染都具有极其重要的意义。由于氮素的吸收利用与植物的生长速率直接相关,本研究首先对小水榕(Anubias nana)、狐尾藻(Myriophyllum verticillatum)、吊兰(Chlorophytum comosum)等21种速生植物的生长速率进行了筛选,发现吊兰、狐尾草、日本宫廷草和圆叶元宝草的生长速度相对较快,湿重增加较多,0.5g植物健壮茎枝生长4周后湿重分别增长56%、52%、72%和84%。尤其需要指出的是,吊兰具有根系发达,且生长快速,生长能力极强,可长期水培存活的特点。水培吊兰与供试的其他植物相比,根系柔软洁白、晶莹剔透,长势比土培更旺盛。为此,以吊兰根系为材料,利用简并引物扩增技术和RACE技术,成功从吊...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1-1拟南芥硝酸盐转运蛋白AtNRT1.1（Tsayetal，2007）

T-DNA突变体发现CHL1。最初它被认为成编码低亲和硝酸盐转运蛋白的基因，但研究表明它是一个通过苏氨酸磷酸化开关来实现高低亲和转变的双亲和性的转运蛋白（Liuetal，1999；Tsayetal，1993）（图1-1）。高等植物中NRT1家族非常庞大，该家族基因数量很多....

图2-1简并引物的设计

第二章硝酸盐转运蛋白编码基因的克隆EF6：GCNTTYCAYYTNAGYTGG，DER6：CCANARYCTNCCYCTCATNCEF7：GGNTGGGGNAAYATGGGN，DER7：CATRCTNCCCCACATNGGEF8：YGTNTGYTGYCARTTYTGG，D....

图2-2吊兰根部RNA电泳图

0.540.510.560.480.530.590.520.550.620.720.680.740.540.570.590.560.530.530.520.570.630.550.450.57及反转录cDNA用植物总RNA提取....

图2-3Touch-downPCR扩增Fig.2-3Touch-downPCRamplification

图2-3Touch-downPCR扩增g.2-3Touch-downPCRamplificaker；Lane1：CcNPF8.3.1编码基因扩rker;Lane1:ThePCRfragmentofCc

本文编号：3983876