题目一 APP/PS1/LC3三转基因小鼠的构建及其自噬流动态变化研究 题目二 雷帕霉素对阿尔茨海默病的保护作用及其机制

发布时间：2024-06-04 06:32

　　目的:构建APP/PS1/LC3三转基因小鼠并观察自噬流在阿尔茨海默病中的动态变化。方法:将CAG-mRFP-e GFP-LC3转基因自噬流模型小鼠与APP/PS1双转基因阿尔茨海默病(Alzheimer’s Disease,AD)模型小鼠交配繁殖,对产下的子代进行基因分型鉴定,选出同时含有CAG-mRFP-eGFP-LC3基因和APP/PS1的小鼠为APP/PS1/LC3三转基因小鼠,Morris水迷宫实验检测小鼠行为学变化,透射电镜下观察自噬体的形成,采用免疫组织化学法检测老年斑的形成。取3月龄、6月龄、10月龄APP/PS1/LC3三转基因小鼠和同窝同月龄CAG-mRFP-eGFP-LC3单转基因小鼠各6只,断头取脑后在荧光显微镜下观察自噬流的变化,用Western blot检测自噬标志物。结果:基因分型证实APP/PS1/LC3三转基因小鼠构建成功。Morris水迷宫显示,APP/PS1/LC3三转基因小鼠找到平台的平均潜伏期和路程均明显增加,穿越平台的次数明显减少。透射电镜下观察,6月龄APP/PS1/LC3三转基因小鼠脑神经元内出现更多的自噬小泡。免疫组化染色结果显示3月龄...

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【部分图文】：

图1APP/PS1/LC3三转基因小鼠的基因分型鉴定

重庆医科大学硕士研究生学位论文PS1/LC3三转基因小鼠的鉴定PS1/LC3三转基因小鼠的基因分型筛选雄性的种鼠产下后代，剪鼠尾提取基因组DNA经PCR扩增后，同时出现APP，PS1，CAG条带的即为APP/PS1/LC3三转基S1双转基因小鼠，2、3、5....

图4透射电镜观察6月龄APP/PS1/LC3三转基因小鼠和同窝

a)CAG-mRFP-eGFP-LC3单转基因小鼠脑神经元内无自噬小体；b)APP/PS1/LC3三转基因小鼠脑神经元内出现数量较多的自噬小体（箭头指向区域）图4透射电镜观察6月龄APP/PS1/LC3三转基因小鼠和同窝CAG-mRFP-eGFP-LC3单转基....

图8不同月龄APP/PS1/LC3三转基因小鼠脑内自噬体和自噬溶酶体情况比较

重庆医科大学硕士研究生学位论文2.2.1.4不同月龄APP/PS1/LC3三转基因小鼠脑内自噬体和自6月龄APP/PS1/LC3三转基因小鼠脑海马区自噬体数量高于APP/PS1/LC3三转基因小鼠，3月龄APP/PS1/LC3三转基因小数量低于10月龄。脑....

图12免疫荧光检测显示老年斑和自噬体、自噬溶酶体的共存情况

(a-d)3月龄CAG-mRFP-eGFP-LC3单转基因小鼠(e-h)3月龄APP/PS1/LC3三转基因小鼠（i-l）6月龄CAG-mRFP-eGFP-LC3单转基因小鼠（m-p）6月龄APP/PS1/LC3三转基因小鼠（q-t）10月龄CAG-....

本文编号：3988995