苹果MdMRLK2基因在抗逆中的功能初探

发布时间：2024-07-07 03:59

　　植物类受体激酶(Receptor-Like Kinases,RLK_S)是一类含有受体结构域的单次跨膜蛋白,含有丝氨酸/苏氨酸激酶结构域,能够识别胞外的各种信号,在植物生长发育和激素调节中发挥重要作用。拟南芥中的FER基因的功能近几年被广泛报道,但苹果中关于此类基因的报道数量较少。本研究在实验室前期研究的基础上,通过系统比较苹果基因组中所有的FER基因,选择与拟南芥FER相似度最高的MdMRLK2作为研究对象,通过农杆菌介导的遗传转化成功获得了MdMRLK2过量表达及干扰表达的苹果转基因株系,并以该转基因植株为材料鉴定了MdMRLK2对干旱、盐胁迫以及腐烂病抗性的调控功能。获得的主要结果如下:1.苹果MdMRLK2的表达分析。通过对MdMRLK2的基因表达情况进行分析后发现,MdMRLK2在植物不同组织中均有所表达,并在根中的表达量最高。在干旱胁迫、盐胁迫和腐烂病菌侵染条件下,MdMRLK2的表达量均呈现随处理时间的增加,表达量下降的趋势,说明MdMRLK2在植物应答生物胁迫和非生物胁迫中均有参与。2.苹果MdMRLK2在干旱胁迫下的功能分析。对MdMRLK2过表达...

【文章页数】：58 页

【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
主要符号对照表
第一章 文献综述
    1.1 干旱胁迫概述
        1.1.1 干旱胁迫对植物的影响
        1.1.2 植物响应干旱胁迫的过程
    1.2 盐胁迫概述
        1.2.1 盐胁迫对植物的影响
        1.2.2 植物响应盐胁迫的过程
    1.3 类受体激酶研究进展
        1.3.1 类受体激酶在植物生长发育中的作用
        1.3.2 类受体激酶在非生物胁迫中的作用
        1.3.3 类受体激酶在生物胁迫中的作用
        1.3.4 类受体激酶参与植物响应胁迫的过程
    1.4 本研究的目的与意义
第二章 苹果MdMRLK2 基因克隆与表达分析
    2.1 试验材料
        2.1.1 植物材料
        2.1.2 载体与菌株
        2.1.3 主要试剂
        2.1.4 主要引物
        2.1.5 主要仪器及设备
    2.2 试验方法
        2.2.1 逆境处理
        2.2.2 植物RNA提取
        2.2.3 cDNA第一链的合成
        2.2.4 生物信息学分析
        2.2.5 基因克隆
        2.2.6 基因表达分析
        2.2.7 进化树构建
    2.3 结果与分析
        2.3.1 MdMRLK2 基因序列分析
        2.3.2 MdMRLK2 基因表达模式分析
    2.4 讨论
    2.5 小结
第三章 MdMRLK2 转基因苹果的抗逆功能分析
    3.1 材料与方法
        3.1.1 植物材料
        3.1.2 引物
        3.1.3 主要试剂与培养基配方
        3.1.4 植物表达载体的构建
        3.1.5 农杆菌介导的苹果遗传转化
        3.1.6 转基因苹果干旱处理
        3.1.7 叶片气孔开张度观察
        3.1.8 转基因苹果盐胁迫处理
        3.1.9 腐烂病菌侵染
        3.1.10 数据统计分析
    3.2 结果与分析
        3.2.1 转基因苹果植株的鉴定
        3.2.2 转基因苹果抗旱性分析
        3.2.3 ABA处理下过表达MdMRLK2 植株的气孔运动情况
        3.2.4 转基因苹果抗盐性鉴定
        3.2.5 转基因苹果抗腐烂病菌鉴定
    3.3 讨论
        3.3.1 过表达MdMRLK2 转基因苹果在干旱胁迫下的抗性
        3.3.2 过表达MdMRLK2 转基因苹果在盐胁迫下的抗性
        3.3.3 过表达MdMRLK2 转基因苹果在抗腐烂病菌的表型分析
    3.4 小结
第四章 结论和创新点
    4.1 结论
    4.2 创新点
参考文献
致谢
个人简历



本文编号：4003121