miRNA-968靶向HIPPO信号通路expanded基因响应DNA损伤

发布时间：2024-11-02 19:35

　　DNA损伤是由外在环境因素或机体内在因素导致的机体细胞DNA结构的改变。DNA损伤类型有多种,包括DNA碱基的突变与缺失、DNA单链断裂、DNA双链断裂等。为了保护基因组的稳定性,机体内存在着响应和修复DNA损伤的复杂网络,称之为DNA损伤应答。发生DNA损伤后,DNA损伤应答被激活,一系列基因的转录受到调控,使细胞周期发生阻滞,进行DNA损伤修复。当DNA损伤不能被完全修复时,存在DNA损伤的细胞发生凋亡。DNA损伤应答的异常会导致机体发生一系列的疾病。研究表明,DNA损伤应答不但需要蛋白质编码基因的参与,也需要非编码RNA基因的参与。非编码RNA曾经认为是“垃圾RNA”,随着研究的深入,非编码RNA的功能逐渐被揭示,在生命活动中发挥着广泛的调控作用。miRNA是非编码RNA的一种,最早发现于1993年,在线虫中鉴定发现了第一个miRNA。miRNA主要通过“种子序列”与靶基因mRNA的3’端非编码区结合,在转录后水平抑制靶基因的表达或降解靶基因。miRNA在参与DNA损伤应答时,主要表现为DNA损伤后被诱导表达,或参与DNA损伤信号转导、细胞周期检验点、DNA损伤修复和细胞凋亡。对于...

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中文摘要
英文摘要
(一)前言
(二)材料和方法
    1. 材料
        1.1 果蝇品系
        1.2 引物
        1.3 miRNA mimics
        1.4 工具质粒
        1.5 细胞
        1.6 实验试剂
        1.7 实验仪器
    2. 方法
        2.1 溶液配制
        2.2 果蝇培养
        2.3 EdU检测
        2.4 图像数据分析
        2.5 单只果蝇PCR检测
        2.6 提取果蝇基因组DNA
        2.7 质粒构建
        2.8 S2细胞培养
        2.9 双荧光素酶报告实验
        2.10 数据统计分析
(三)实验结果
    1. 30 株miRNA突变果蝇对DNA损伤敏感
    2. miR-986^KO和miR-968-1002^KO果蝇株出现DNA损伤诱导的S期检验点缺陷
    3. miR-284^KO和miR-995^KO果蝇株果蝇株出现DNA损伤诱导的S期检验点增强
    4. miR-968 靶向expanded
        4.1 miR-986,miR-968,miR-1002 靶基因分析
        4.2 构建miR-986,miR-968,miR-1002 靶基因质粒
        4.3 miR-986,miR-968,miR-1002 靶基因的验证
        4.4 突变expanded 3′UTR中miR-968 种子序列识别位点
    5. miR-986,miR-968,miR-1002 共突变果蝇无更严重的S期检验点缺陷
(四)讨论
(五)结论
(六)参考文献
综述
    参考文献
致谢



本文编号：4010023