Sp110基因沉默对巨噬细胞抗结核分枝杆菌的影响及功能研究

发布时间：2025-02-11 17:49

　　目的:通过特异的si RNA构建Sp110表达降低的细胞模型,在此基础上研究Sp110对结核杆菌感染后的巨噬细胞的影响,以便为促进抗结核基因的转基因合成以及发现治疗结核病的新方法奠定基础。方法:利用Lipofectamin TM3000 Reagent包裹si RNA对巨噬细胞进行转染,进行实时荧光定量PCR检测RAW264.7细胞中Sp110基因m RNA水平的表达量,对细胞进行总蛋白的提取,利用Western Blot方法检测转染后巨噬细胞中SP110蛋白的表达情况。成功构建Sp110低表达的巨噬细胞后,分别用BCG、H37Ra感染巨噬细胞,于感染6 h后对细胞进行清洗,去除细胞外的结核杆菌并将此时记为0h。利用抗酸染色分析巨噬细胞吞噬结核杆菌的情况,选取0 h、24 h、48 h、72 h四个时间段绘制细胞生长曲线以了解增殖情况,利用流式细胞术分析细胞死亡情况。结果:(1)si RNA转染24h后,阴性对照组细胞形态与空白对照相比未发生明显变化,细胞胞体呈圆形,折光性强,胞内颗粒少;si RNA组细胞胞体出现触角,胞浆中黑色颗粒增多;(2)经转染si RNA24 h后,与空白对照组...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1RAW264.7细胞形态变化（×100）

Sp110基因沉默对巨噬细胞抗结核分枝杆菌的影响及功能研究14结果1.siRNA转染24h后RAW264.7细胞变化在细胞进行siRNA转染24h后，观察细胞形态，结果可见三组的细胞数量接近，没有明显的改变，NC组细胞形态相较于Control组未发生明显变化，显微镜下可见细胞的胞....

图3Sp110基因对细胞中SP110蛋白表达的影响

Sp110基因沉默对巨噬细胞抗结核分枝杆菌的影响及功能研究150.001）。NC组与Control组相比蛋白表达量虽然有些许增加但无统计学意义（P>0.05）（见图3）。（a）（b）图3Sp110基因对细胞中SP110蛋白表达的影响Figure3InfluenceofSp110g....

图4结核杆菌感染RAWFigure4RAW264.7cellsinfectedby注：图A与图B组为BCG感染的NC-1组和siRNA-1组

Sp110基因沉默对巨噬细胞抗结核分枝杆菌的影响及功能研究150.001）。NC组与Control组相比蛋白表达量虽然有些许增加但无统计学意义（P>0.05）（见图3）。（a）（b）图3Sp110基因对细胞中SP110蛋白表达的影响Figure3InfluenceofSp110g....

本文编号：4033629