雷公藤三萜合成途径关键酶基因克隆与表达分析

发布时间：2025-02-11 15:24

　　雷公藤（Tripterygium wilfordii Hook.f.）是一种重要的药用植物,具有抗癌、抗炎、调节免疫系统等作用,并具有较强的杀虫活性。雷公藤红素（celastrol）是雷公藤最具代表性的三萜物质,药理活性高,作用广泛,极具开发价值。鲨烯合酶（Squalene synthase,SQS）、鲨烯环氧酶（Squalene epoxidase,SE）、环氧角鲨烯环化酶（Oxidosqualene cyclases,OSC）被认为是三萜类次生代谢途径中的关键限速酶,是三萜合成生物学研究的重要元件之一。根据前期对雷公藤根转录组数据的分析设计引物,克隆得到1个鲨烯合酶（TwSQS）、2个鲨烯环氧酶编码（TwSE1、TwSE2）、4个环氧角鲨烯环化酶（TwOSC1、TwOSC2、TwOSC3、TwOSC4）基因,对它们进行基本生物信息学分析。荧光定量PCR（real-time PCR）方法检测它们在雷公藤不同组织部位的表达模式,以及在雷公藤发状根中受茉莉酸甲酯（MeJA）诱导处理后基因的表达量变化,结合HPLC检测雷公藤红素含量的变化。主要结果如下:1.TwSQS基因的开放阅读框（Ope...

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图1-1MVA和MEP生物合成途径Figure1-1BiosyntheticpathwayofMVAandMEP实线表示一步反应；虚线表示多步反应Solidlinerepresentsonestepreaction;ThedottedlinerepresentsamμLti-stepreaction

磷酸（glyceraldehyde-3-phosphate,GA3P）作为原料，二者缩合后，经过各级酶催化经转酮酶催化聚合成1-去氧木糖-5-磷酸（1-deoxy-DxylμLose-5-phosphate,DXP）这一体，经异构化和还原等反应，形....

图1-2三萜生物合成途径Figure1-2Biosyntheticpathwayoftriterpenoid

图1-2三萜生物合成途径Figure1-2Biosyntheticpathwayoftriterpenoid三萜合成途径关键酶雷公藤三萜合成途径没有系统的研究报道，但雷公藤三萜合多被研究报道了，HMGR(WUetal.2012)、GPPS(Zhangeta....

图1-3雷公藤红素的化学结构式Fig1-3Chemicalformulaofcelastrol

图1-3雷公藤红素的化学结构式Fig1-3Chemicalformulaofcelastrol理活性中，尤其以抗癌、抗炎活性最为显著，自从中美癌新机制以来(Yangetal.2006)，引发了雷公藤红素的抗多研究表明，雷公藤红素对多种癌症具有抗肿瘤作用，等几十....

图2-1雷公藤根总RNAM:DL2000;1,2:ThetotalRNA

图2-1雷公藤根总RNAM:DL2000;1,2:ThetotalRNA-1TotalRNAextractionofrootinTripterygiu因克隆与生物信息学分析基因克隆据库筛选出的鲨烯合酶基因序列，设cDNA为模板，进行PCR扩增....

本文编号：4033460