日本血吸虫凋亡基因Sjcaspase3的克

发布时间：2017-06-18 18:12

  本文关键词：日本血吸虫凋亡基因Sjcaspase3的克隆、真核表达及其功能分析，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：为深入研究日本血吸虫细胞凋亡机制。利用PCR技术扩增得到Sjcaspase3的全长序列,其ORF含900 bp,编码299个氨基酸,理论分子量为33 509.7 Da,理论等电点为6.39。Real-time PCR分析表明该基因在日本血吸虫生长发育的各个时期均有表达,其中21 d表达量最高,42 d雌虫表达量高于42 d雄虫。成功构建了p XJ40-FLAG-Sjcaspase3重组质粒并转染到Hela细胞内,荧光定量PCR和Western blotting分析表明Sjcaspase3成功在Hela细胞中表达。酶活分析提示重组Sjcaspase3具有切割特异性底物天冬氨酸-谷氨酸-缬氨酸-天冬氨酸(DEVD)的活性。流式细胞术检测了Sjcaspase3可诱导Hela细胞发生早期细胞凋亡。研究结果为深入探讨Sjcaspase3的生物学功能及日本血吸虫细胞凋亡机制奠定了基础。
【作者单位】： 中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室;
【关键词】： 日本血吸虫 caspase 细胞凋亡 酶活 细胞流式
【基金】：国家自然科学基金(Nos.81271871,31172315)资助~~
【分类号】：R383.24
【正文快照】：

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本文编号：460356