弓形虫Rop46基因敲除虫株的构建及其生长复制能力评价

发布时间：2017-06-20 14:18

  本文关键词：弓形虫Rop46基因敲除虫株的构建及其生长复制能力评价，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：棒状体蛋白(Rops)是弓形虫的一类与侵入、复制相关的重要分泌蛋白。Rop46蛋白在弓形虫急性感染阶段和慢性感染阶段的表达存在显著差异。为探究Rop46的生物学功能,本研究采用CRISPR/Cas9技术构建了Rop46基因敲除重组质粒,制备了Rop46基因缺失虫株。序列分析表明,基因缺失虫株中的Rop46基因的编码序列缺失了82个碱基,证明本研究构建的基因敲除重组质粒能够有效的在弓形虫PLK虫株中敲除目的基因。利用流式细胞术对Rop46基因缺失虫株的生长特性进行检测和分析,结果显示Rop46基因缺失虫株的侵入和复制效率显著降低,表明缺失Rop46基因可能对PLK虫株的侵入及复制能力具有显著影响。
【作者单位】： 黑龙江八一农垦大学动物科技学院;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所-密歇根州立大学天然免疫联合实验室;
【关键词】： 弓形虫 Rop CRISPR/Cas
【基金】：兽医生物技术国家重点实验室自主课题(SKLVBP2015012)
【分类号】：S852.7
【正文快照】： 弓形虫(Toxoplasma gondii)属于顶复门,球虫1.2 Rop46敲除重组质粒的构建利用PCR扩增目,弓形体属的一种专性细胞内寄生原虫,具有广pS AG:CAS-U6:sgU RPT(addgene:addgene,#54467)泛的宿主群,几乎可以感染所有的哺乳动物、鸟类(删除了其中guide RNA的启动子及其guide RNA的和爬

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