靶向干扰高尔基体蛋白73基因对肝癌细胞侵袭转移能力的影响及分子机制的研究

发布时间：2017-06-22 21:05

  本文关键词：靶向干扰高尔基体蛋白73基因对肝癌细胞侵袭转移能力的影响及分子机制的研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的：探讨靶向干扰高尔基体蛋白73 (Golgi glycoprotein 73, GP73)基因对肝癌细胞系SMMC-7721和Bel-7404侵袭、转移能力的影响及对EMT及通路相关分子的影响。方法：用脂质体介导siRNA瞬时转染SMMC-7721口Bel-7404细胞,转染细胞分为3组：空白对照组(正常培养的SMMC-7721 和 Bel-7404细胞)、阴性对照组(转染随机序列的siRNA)及实验组(转染GP73 siRNA).应用定量PCR(即时聚合酶链锁反应,Real-time Polymerase Chain Reaction,简称RT-PCR)技术检测靶向干扰后GP73基因的变化；Transwell小室试验和细胞划痕实验分别检测GP73干扰后对SMMC-7721和Bel-7404细胞侵袭、迁移能力的影响,使用western-blot法及RT-PCR法检测EMT相关分子E-cadherin及通路相关分子TGF-β1及smad2。结果：干扰GP73基因表达后,其基因和蛋白水平表达较空白对照组及阴性对照组显著性降低(P0.05)。Transwell小室试验和细胞划痕实验分别显示干扰GP73表达后,SMMC-7721和Bel-7404细胞侵袭和迁移能力均受到显著性抑制(P均0.05),western-blot法及RT-PCR法示实验组中E-cadherin表达升高及TGF-β1及smad2表达下降。GP73与E-cadherin的表达呈负相关,TGF-(31及smad2表达的呈正相关结论：GP73基因能有效促进肝癌细胞的侵袭、转移能力,考虑可能通过TGF-β1/Smad2通路诱导EMT发生,GP73有望成为抑制肝癌侵袭、转移的潜在治疗靶点。
【关键词】：肝癌 高尔基体蛋白73 siRNA 侵袭 转移
【学位授予单位】：新疆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R735.7
【目录】：

• 中英文缩略词对照表5-7
• 摘要7-8
• ABSTRACT8-9
• 前言9-11
• 研究内容与方法11-18
• 1 材料11
• 2 方法11-17
• 3 划痕实验17
• 4 统计学处理17-18
• 结果18-23
• 讨论23-27
• 小结27-28
• 致谢28-29
• 参考文献29-31
• 综述31-38
• 参考文献35-38
• 攻读硕士学位期间发表的学位论文38-39
• 导师评阅表39

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本文编号：473062