结核分枝杆菌标准株H37Rv mazEF3基因过表达菌株的构建及初步鉴定

发布时间：2017-06-26 20:02

  本文关键词：结核分枝杆菌标准株H37Rv mazEF3基因过表达菌株的构建及初步鉴定，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：为构建H37Rv mazEF3基因的过表达菌株,检测过表达菌株mazEF3 mRNA表达水平。使用穿梭质粒pMV361,把mazEF3基因连入其中,构建重组质粒pMV361-mazEF3;利用电穿孔技术,将穿梭表达质粒导入H37Rv中,并将该菌涂在卡那霉素培养基上初步筛选,提取阳性菌株质粒进行PCR、双酶切后送公司测序进一步验证;检测不同电转电压下mazEF3 mRNA表达水平,寻找最佳电转电压。结果显示,成功构建H37Rv mazEF3基因的过表达菌株,PCR、双酶切后目的基因,测序结果与已知mazEF3基因比对,同源性100%。实时荧光定量检测,电转电压为2300V时,构建的过表达菌株mazEF3 mRNA表达量最高。由此可知,成功构建及初步鉴定了mazEF3 mRNA过表达菌株,电转电压为2300V时,构建的过表达菌株mazEF3 mRNA表达量最高。
【作者单位】： 石河子大学医学院病原生物学与免疫学教研室;
【关键词】： 结核分枝杆菌 mazEF 毒素-抗毒素系统 过表达
【基金】：国家自然科学基金项目(81341079,81560262)
【分类号】：R378.911
【正文快照】： 结核病(tuberculosis,TB)是由结核分枝杆菌(Mycobacteria tuberculosis,MTB)感染引起的慢性传染病,是一个严重的公共卫生问题。结核病发病人数始终位居甲、乙两类传染病前列,每年死亡人数超过200万。随着人口流动性的增加、MTB耐药率的增加、艾滋病等免疫缺陷疾病日益增多,结

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 李靖云;胡瑞;杜秋妹;尹相云;王婷婷;王东辉;张立国;;死亡受体6的胞内结构域对其亚细胞定位的调节[J];生物物理学报;2014年02期

2 ;[J];;年期

  本文关键词：结核分枝杆菌标准株H37Rv mazEF3基因过表达菌株的构建及初步鉴定，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：487379