中国水仙NtFT2正义基因表达载体的构建与愈伤组织遗传转化体系的建立

发布时间：2017-07-02 11:19

  本文关键词：中国水仙NtFT2正义基因表达载体的构建与愈伤组织遗传转化体系的建立，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：构建中国水仙Nt FT2正义基因表达载体,为进一步研究Nt FT2基因对中国水仙芽休眠调控作用提供参考;建立中国水仙愈伤组织遗传转化体系,为中国水仙愈伤组织遗传转化提供技术平台。笔者以中国水仙主芽为材料,通过PCR扩增获得Nt FT2基因;通过PCR、双酶切、连接等方法将Nt FT2基因正向插入到p CAMBIA1301双GUS植物表达载体构建Nt FT2正义基因表达载体P1301-FT2,再通过冻融法将重组质粒P1301-FT2导入根癌农杆菌。采用根癌农杆菌介导法将Nt FT2正义基因转化中国水仙愈伤组织,采用GUS组织化学染色法检测中国水仙愈伤组织遗传转化效率。结果表明,试验成功构建了中国水仙Nt FT2正义基因表达载体P1301-Nt FT2;中国水仙愈伤组织与0.5 mol/L甘露醇共培养6 h后,置于1.0 OD600的农杆菌重悬液中侵染20 min,在25℃、黑暗条件下,共培养6天,其GUS瞬时表达率达到64.28%。构建了中国水仙Nt FT2正义基因表达载体,建立了高效的中国水仙愈伤组织遗传转化体系。
【作者单位】： 泉州师范学院资源与环境科学学院;福建农林大学园艺产品贮运保鲜研究所;
【关键词】： 中国水仙 NtFT基因 愈伤组织 遗传转化
【基金】：国家十一五科技支撑计划项目“台湾农业新品种、新技术引进创新研究与示范”(2007BAD07B01) 福建农林大学创新团队项目“园艺植物种质与高优生产技术创新”(cxtd12013)
【分类号】：S682.21
【正文快照】： 0引言为进一步研究Nt FT2基因对中国水仙芽休眠调控作用提供参考,为中国水仙愈伤组织遗传转化提供技术平台。良好的遗传转化体系是遗传转化成功的决定因素之一,而根癌农杆菌介导法是遗传转化的首选方法[1]。中国水仙遗传转化主要采用根癌农杆菌法介导转化带盘鳞茎[2-5]或愈伤

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