苯达莫司汀在中国人群中药代动力学、药效学研究及SLC22A1、CYP1A2、GSTA1基因单核酸多态性与其血药浓度相关性

发布时间：2017-07-06 18:17

  本文关键词：苯达莫司汀在中国人群中药代动力学、药效学研究及SLC22A1、CYP1A2、GSTA1基因单核酸多态性与其血药浓度相关性分析

  更多相关文章： 苯达莫司汀 药代动力学 药效学 CYP1A2 GSTA1 SLC22A1 单核酸基因多态性

【摘要】：目的:研究苯达莫司汀在中国人群(B细胞惰性淋巴瘤患者)中药代动力学、药效学特性,并分析与苯达莫司汀转运、代谢相关基因SLC22A1、CYP1A2、GSTA1的SNP对其血药浓度的影响。方法:1采用超高效液相串联质谱(UPLC-MS/MS)建立测定苯达莫司汀血药浓度方法,并进行方法学验证,包括考察方法的专一性、准确度、精密度、基质效应、回收率、样品稳定性、稀释效应。2按入选、排除标准,筛选14位在天津医科大学肿瘤医院接受治疗的B细胞惰性淋巴瘤患者进行药代动力学研究。受试者按照120 mg/m2/d,第1天和第2天给药,以21天为一个周期。静脉滴注时长120分钟。用药第一天于静脉滴注前(0 h)和滴注开始后1 h、2 h,滴注完成后5 min、10 min、20 min、30 min、45 min、1 h、1.5 h、2 h、2.5 h、3 h、4 h、6 h、8 h从静脉采血4.0 ml。静脉血以肝素钠抗凝后,在3000 r/min,4℃条件下离心4 min,血浆置于-80℃冰箱中冷冻保存待测。UPLC-MS/MS法测定苯达莫司汀血药浓度,应用DAS2.0软件计算药代动力学参数。3按入选、排除标准,筛选21位受试者进行Ⅱ期研究(其中5位受试者用药一周期后,停止用药,退出临床试验),用药6周期后采用RECIST标准评价苯达莫司汀药效。同时,将给药方案调整为静脉滴注4 h;在给药结束时、第二次给药前采集血样,测定苯达莫司汀血药浓度。4使用QIAamp血液DNA提取试剂盒提取DNA,采用PCR-直接测序法检测SLC22A1(rs200684404,rs4646277,rs2282143,rs628031,rs35167514,rs622342)、CYP1A2(rs762551,rs2069514,rs2470890,rs2472304,rs12720461)、GSTA1(rs3957356,rs3957357)的多态性。采用SPSS19.0软件统计分析SNP与苯达莫司汀血药浓度之间的关系。结果:1建立了UPLC-MS/MS法测定苯达莫司汀血药浓度。其专一性、准确度、精密度、基质效应、回收率、样品稳定性、稀释效应均符合药代动力学研究要求。血浆苯达莫司汀浓度在5~1000 ng·m L-1范围内线性关系良好(r2=0.9981),定量下限为5 ng·m L-1,日内和日间精密度(RSD)均小于12.17%,准确度为91.39%~99.60%;提取回收率和基质效应分别为102.70%~104.77%和84.82%~91.77%。2单次静脉滴注盐酸苯达莫司汀120 mg/m2/d,滴注时长120min;主要药代动力学参数:Cmax为4822.571±3477.123 ng·m L-1;CL为25.75±15.198 L/h/m2;t1/2为0.388±0.157 h;AUC(0-∞)为6463.691±3859.084ug/L*h。3Ⅱ期16例受试者进行疗效评价结果:盐酸苯达莫司汀以120 mg/m2/d,第一天、第二天给药,以21天为一个周期,滴注时长为4 h,疗效CR为12.5%、PR为50.0%、SD为18.8%、PD为18.8%。4 SNP分型结果发现只有SLC22A1(rs683369、rs2282143、rs628031、rs622342),CYP1A2(rs762551、rs2069514、rs2472304、rs2470890)存在多态性。我们并未发现SNP与苯达莫司汀血药浓度存在相关性。结论:1已建立的检测苯达莫司汀血药浓度UPLC-MS/MS方法满足临床药代动力学要求。2苯达莫司汀药代动力学研究结果表明其在体内快速消除,t1/2为0.388±0.157 h。3在中国人群中试验表明,苯达莫司汀治疗B细胞惰性淋巴瘤有较好疗效。4我们并未发现SNP与苯达莫司汀血药浓度之间存在相关性,可能原因是样本量太少造成的。
【关键词】：苯达莫司汀 药代动力学 药效学 CYP1A2 GSTA1 SLC22A1 单核酸基因多态性
【学位授予单位】：天津医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R969.1
【目录】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-11
• 缩略语/符号说明11-13
• 前言13-18
• 研究现状、成果13-17
• 研究目的、方法17-18
• 一、UPLC-MS/MS法测定苯达莫司汀血药浓度及药代动力学研究18-33
• 1.1 材料和方法18
• 1.1.1 药品和试剂18
• 1.1.2 仪器18
• 1.2 血浆中苯达莫司汀测定的方法建立18-20
• 1.2.1 液相条件18-19
• 1.2.2 质谱条件19
• 1.2.3 工作溶液配制19-20
• 1.2.4 含药样品的配制20
• 1.2.5 样品处理20
• 1.3 血浆中苯达莫司汀测定的方法学验证20-26
• 1.3.1 方法的专属性20-21
• 1.3.2 标准曲线制备21-22
• 1.3.3 最低定量浓度（LLOQ）22
• 1.3.4 准确度和精密度22-23
• 1.3.5 基质效应和回收率考察23-24
• 1.3.6 稳定性考察24-25
• 1.3.7 稀释效应25-26
• 1.4 苯达莫司汀药代动力学研究26-29
• 1.4.1 药物26
• 1.4.2 试验方案26
• 1.4.3 受试者血浆中苯达莫司汀浓度测定26-29
• 1.4.4 苯达莫司汀药代动力学研究29
• 1.5 苯达莫司汀Ⅱ期受试者血药浓度测定29-30
• 1.5.1 受试者血浆样品采集29
• 1.5.2 Ⅱ期受试者苯达莫司汀血浆药物浓度测定29-30
• 1.6 讨论30-31
• 1.6.1 样品处理30-31
• 1.6.2 内标筛选31
• 1.6.3 药代动力学分析31
• 1.7 小结31-33
• 二、苯达莫司汀药效学研究33-39
• 2.1 材料和方法33-36
• 2.1.1 受试者33-35
• 2.1.2 研究方法35-36
• 2.2 讨论36-38
• 2.3 小结38-39
• 三、转运、代谢相关基因SNP对苯达莫司汀血药浓度影响研究39-51
• 3.1 材料和方法39-43
• 3.1.1 药品和试剂39
• 3.1.2 DNA提取39-40
• 3.1.3 SLC22A1、CYP1A2, GSTA1相应的SNP分型40-43
• 3.2 结果43-49
• 3.2.1 SLC22A1、CYP1A2, GSTA1相应的SNP分型结果43-47
• 3.2.2 SLC22A1、CYP1A2相应的SNP对对苯达莫司汀的血药浓度的影响47-49
• 3.3 讨论49-50
• 3.4 小结50-51
• 结论51-52
• 参考文献52-59
• 发表论文和参加科研情况说明59-60
• 附录60-61
• 综述 苯达莫司汀药代动力学、代谢相关基因的单核酸多态性研究进展61-71
• 综述参考文献66-71
• 致谢71-72
• 个人简历72

，

本文编号：527297