转异源chi基因的Bt工程菌株的生防潜力评价

发布时间：2017-07-16 07:25

  本文关键词：转异源chi基因的Bt工程菌株的生防潜力评价

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【摘要】：【目的】构建增强抑制真菌能力兼杀虫的苏云金芽胞杆菌多功能生防菌株。【方法】将含有组成型高效表达启动子、地衣芽胞杆菌chi MY基因的重组质粒p DM,转化进杀虫活性高且有一定抑菌活性的Bt519-1菌株。酶谱分析方法确认Bt519(p DM)组成型异源表达几丁质酶。室内测定工程菌株抑菌谱,计算抑菌效率,确定最敏感的植物病原真菌,进行植物盆栽病害防治的应用潜力评价。将不同浓度的Bt粗酶液灌入甜椒幼苗根部,12 h后接种辣椒疫霉孢子液,接种2 d后开始观察,记录发病株数。自7 d起调查植株发病情况统计并分析防治效果。【结果】SDS-PAGE及酶谱分析证明,Bt519(p DM)能够特异表达68 k D蛋白,该蛋白为异源几丁质酶Chi MY。抑菌谱测定证明,工程菌抑制效率达到90%以上的有5种真菌,其中最明显的是辣椒疫霉。盆栽实验证明,Bt519(p DM)7 d的防效为73.2%。工程菌株对棉铃虫的半致死浓度(LC50)为121.26 mg/L。【结论】Bt519(p DM)是一株有应用潜力的生防菌株。
【作者单位】： 南开大学生命科学学院微生物学系;南开大学分子微生物学与技术教育部重点实验室;南开大学农药国家工程研究中心;
【关键词】： 苏云金芽胞杆菌 几丁质酶 组成型表达 广谱抑真菌 辣椒疫霉
【基金】：国家自然科学基金项目(No.31371979) 教育部博士点基金项目(No.20120031110019) 天津市自然科学基金项目(No.12JCYBJC198000)~~
【分类号】：S476;Q78
【正文快照】： 对苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)的研究历史已超过100年。目前上百种Bt商品制剂在世界各地登记注册,成功用于多种农、林、果蔬和卫生害虫的防治[1-2]。为了加速昆虫的罹病进程、提高死亡率,近年来学者开始关注几丁质酶对Bt的增效作用。昆虫中肠围食膜的主要结构

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 李蓬飞;罗洋;谢池楚;蔡峻;边强;陈月华;;组成型表达chi基因的Bt工程菌株构建及其特性[J];微生物学通报;2014年05期

【二级参考文献】

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1 张爱玲;张丽;杨明明;张良志;陈宏;;鸟枪法筛选枯草芽孢杆菌基因强启动子及对黄牛GHRL基因的表达[J];华南农业大学学报;2011年03期

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4 肖亮;刘传;谢池楚;蔡峻;刘东;陈月华;;地衣芽孢杆菌MY75菌株几丁质酶基因的异源表达及特性[J];微生物学报;2010年06期

中国硕士学位论文全文数据库 前1条

1 关小红;枯草芽孢杆菌Tpb55抗菌物质纯化及特性的初步研究[D];中国农业科学院;2008年

【相似文献】

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3 毛旭虎,邹全明,鲁东水,张卫军,吴超,罗萍,王宁;表达幽门螺杆菌尿素酶B亚单位的减毒沙门氏菌工程菌株的构建[J];免疫学杂志;2001年06期

4 张洪斌;朱春宝;胡又佳;朱宝泉;王雅洁;;右旋糖酐蔗糖酶工程菌株的构建及其培养条件的研究[J];微生物学报;2008年04期

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本文编号：547624