金霉素生物合成基因簇中调控基因ctcB的功能

发布时间：2017-07-26 05:11

  本文关键词：金霉素生物合成基因簇中调控基因ctcB的功能

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【摘要】：【目的】研究金霉素产生菌中SARP家族转录调控基因ctc B的作用。【方法】利用大肠杆菌、链霉菌的属间接合转移和同源重组双交换的方法,构建ctc B基因缺失突变株。通过c DNA在相邻同转录方向的基因间隔进行PCR验证,确定金霉素生物合成基因簇中的转录单元。利用荧光定量RT-PCR方法进行突变株金霉素生物合成基因簇的转录水平检测。随后,生物信息学预测分析了金霉素生物合成基因簇内Ctc B与DNA的结合位点。【结果】获得了ctc B基因缺失的双交换突变株。发酵结果显示,该突变株失去产生金霉素与四环素的能力。金霉素生物合成基因簇内有6个共转录单元,其中4个共转录单元在ctc B基因缺失突变株中转录水平明显下降。软件分析预测到一致性较高的Ctc B结合重复序列。【结论】ctc B正调控金霉素生物合成结构基因ctc G-D、ctc H-K、ctc N-P、ctc W-T 4个转录单元和ctc Q,为进一步研究ctc B调控机制奠定了基础。
【作者单位】： 上海交通大学生命科学技术学院微生物代谢国家重点实验室;金河生物科技股份有限公司;
【关键词】： 金霉素 SARP家族转录调控基因 基因敲除 生物合成
【基金】：国家自然科学基金(31470183,31400029) 国家“973计划”(2012CB721004)~~
【分类号】：Q78
【正文快照】： 金霉素(Chlortetracycline,CTC)作为第1个被发现的四环素家族成员,于1948年由Duggar从土壤微生物金黄色链霉菌(Streptomyces aureofacines)中分离得到[1]。金霉素同四环素(Tetracycline,TC)、土霉素属第一代四环素类抗生素,它们是由微生物发酵产生天然产物,而第二、三代四环素

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本文编号：574827