MiR-141通过其靶基因ZEB1、SIP1调控EMT途径在结直肠癌细胞系中的研究

发布时间：2017-07-28 14:23

  本文关键词：MiR-141通过其靶基因ZEB1、SIP1调控EMT途径在结直肠癌细胞系中的研究

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【摘要】：目的通过比较miR-141、靶基因、上皮-间质转化(EMT)标志物在不同结直肠癌细胞系中的差异性表达及相关性;进一步揭示MicroRNA-141通过EMT途径调控结直肠癌肝转移的机制。方法选取具有间质特征的细胞系SW620和RKO。构建含miR-141的重组LV3-p GLV-h1-GFP-puro慢病毒Lenti-miR-141,用空载慢病毒NC-Lenti作为对照;稳定转染及后续实验:通过qRT-PCR和Western Blot检测证实miR-141的成功转染,并比较miR-141、靶基因、EMT标志物在不同结直肠癌细胞系中的差异性表达。结果 miR-141的重组LV3-p GLV-h1-GFP-puro慢病毒Lenti-miR-141、NC-Lenti对细胞系SW620和RKO的最佳感染MOI值均为100;PCR检测证实LentimiR-141病毒的感染使SW620、RKO细胞中miR-141的表达明显增加;免疫组化检测证实miR-141的过表达有效的抑制了靶基因ZEB1和SIP1的表达,同时增加了E-cadherin的表达并减少了vimentin的表达。结论 SW620和RKO具有间质特征;miR-141的过表达有效地抑制了靶基因ZEB1和SIP1的表达,进而影响了EMT途径标志物E-cadherin和vimentin的表达;进一步验证了MicroRNA-141通过EMT途径调控结直肠癌肝转移。
【作者单位】： 首都医科大学附属北京友谊医院普外科国家消化系统疾病临床医学研究中心;
【关键词】： 结直肠癌 MiR- EMT 靶基因
【基金】：国家自然科学基金(81541050,81172317) 北京市自然科学基金(7154191) 北京市优秀人才培养资助(2014000021469G266) 肿瘤侵袭和转移机制研究北京市重点实验室开放研究课题(2015ZLQX01) 北京友谊医院科研启动基金资助项目
【分类号】：R735.34
【正文快照】： 抑制了靶基因ZEB1和SIP1的表达,同时增加了E-cadherin的表达并减少了vimentin的表达。结论SW620和RKO具有间质特征;miR-141的过表达有效地抑制了靶基因ZEB1和SIP1的表达,进而影响了EMT途径标志物E-cadher-in和vimentin的表达;进一步验证了MicroRNA-141通过EMT途径调控结直肠癌

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