arcA基因提高大肠杆菌对有机溶剂的耐受性

发布时间：2017-07-31 06:08

  本文关键词：arcA基因提高大肠杆菌对有机溶剂的耐受性

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【摘要】：【目的】将来源于恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida JUCT1)的基因arc A(编码精氨酸脱亚胺酶)整合到Escherichia coli JM109(DE3)基因组中,以提高该菌对有机溶剂的耐受性。【方法】以P.putida JUCT1的基因组为模板扩增基因arc A,并与p ET-20b(+)连接后导入E.coli JM109(DE3)中,验证该基因提高E.coli JM109(DE3)对有机溶剂的耐受性。利用Red同源重组的方法将arc A整合到E.coli JM109(DE3)基因组中。【结果】E.coli JM109(DE3)/p ET-20b(+)-arc A在添加了2.0%(体积比)环己烷、0.1%(体积比)甲苯、4.0%(体积比)萘烷和0.1%(体积比)丁醇的培养基中培养8 h后,其OD660由初始的0.2分别上升到0.8、0.9、1.8和1.3。将arc A成功整合到E.coli JM109(DE3)基因组中,获得了具有较好遗传稳定性的溶剂耐受E.coli JM109(DE3)宿主菌株。【结论】外源基因arc A能提高大肠杆菌菌株的有机溶剂耐受性,为工业化应用中耐溶剂微生物菌株的构建提供了实验依据和理论基础。
【作者单位】： 江南大学工业生物技术教育部重点实验室;江南大学生物工程学院;
【关键词】： 精氨酸脱亚胺酶 Red同源重组 有机溶剂耐受性 恶臭假单胞菌 大肠杆菌
【基金】：国家自然科学基金项目(No.21276112,31401634) 国家973计划项目(No.2011CB710800) 江苏省自然科学基金项目(No.BK20140135)~~
【分类号】：Q78
【正文快照】： 随着石油、煤炭等能源的极度消耗以及环境污染日益严重,生物技术在医药、农业、精细化工和能源等领域的应用得到了人们极大的关注。因此,构建适应工业化要求的微生物细胞工厂具有重要的现实意义。在生物能源和生物催化等应用领域,微生物宿主细胞的有机溶剂耐受性极为重要。有

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本文编号：597748