对大黑鳃金龟甲幼虫高效的苏云金芽胞杆菌筛选及cry基因鉴定

发布时间：2017-07-31 19:17

  本文关键词：对大黑鳃金龟甲幼虫高效的苏云金芽胞杆菌筛选及cry基因鉴定

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【摘要】：为获得对大黑鳃金龟甲幼虫具有较高杀虫活性的菌株,利用拌土法测定了本实验室分离的500株苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)对大黑鳃金龟甲的杀虫活性,建立Bt菌株比较鉴别技术来进行多样性分析,并对菌株的晶体形态及幼虫感染Bt后的中肠组织切片进行观察。结果显示,从500株Bt菌株中筛选到42株对大黑鳃金龟甲幼虫具有不同程度活性的菌株,分属于14个菌株类型;其中有10株校正死亡率大于60%,261-1菌株杀虫活性最高,7 d校正死亡率达100%。从14个菌株类型中各选取1个代表菌株进行基因鉴定,仅P65-1、1126-1、FCD114和78-2菌株分别含有cry8Ma、cry8Ca、cry8Ab、cry8Ga、cry8Ea共5个cry8类新基因,其它10个菌株均不含cry3、cry8、cry18、cry23、cry37、cry43等对鞘翅目害虫有效的杀虫基因。14个菌株中,78-3、127-2和1198-1菌株能产生双锥体型晶体,261-1、FCD114、P65-1、FTL84、78-2和1126-1菌株能产生球形晶体。幼虫感染261-1、1198-1、FCD114、1126-1、QDL40-2菌株后,中肠组织发生明显的病理变化:2 d时肠壁细胞明显出现空洞化,排列疏松,4 d时受到严重破坏并脱离底膜。表明筛选到的Bt菌株具有防治大黑鳃金龟甲幼虫的潜力。
【作者单位】： 中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室;河北省沧州市农林科学院;
【关键词】： 苏云金芽胞杆菌 多样性分析 大黑鳃金龟甲 cry基因 组织病理
【基金】：国家转基因生物新品种培育重大专项(2014ZX0800913B) 国家“863”计划(2011AA10A203)
【分类号】：S433.5;S476.1
【正文快照】： 大黑鳃金龟甲Holotrichia oblita属鞘翅目金龟总科,是我国东北、华北和黄淮海等地区主要地下害虫,其幼虫(蛴螬)为害植物地下部分,成虫取食植物地上部分(魏鸿钧等,1989),给我国农业生产造成巨大的经济损失。由于大黑鳃金龟甲趋光性较弱、栖居于地下、为害时间长以及卵分批产于

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本文编号：600714