genP基因在依纽小单孢菌中表达的分析

发布时间：2017-08-13 06:02

  本文关键词：genP基因在依纽小单孢菌中表达的分析

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【摘要】：庆大霉素生物合成过程中的genP基因和西索米星生物合成过程中的sisI基因属同工异源酶基因,均能催化绛红糖胺3′,4′-双脱羟基反应。本研究借助组合生物合成,探索绛红小单孢菌中的genP基因能否在依纽小单孢菌中表达。首先构建genP基因替换sisI基因的同源重组质粒pKPI4,并经接合转移将其导入依纽小单孢菌TS388中,最后再通过影印筛选及PCR鉴定获得genP基因替换sisI基因的工程菌PTI886。将野生型菌株TS388、sisI基因缺失突变株TI1102(TS388△sisI)及工程菌PTI886在同等条件下进行发酵,提取其代谢产物并经薄层层析及质谱分析。结果表明,突变株TI1102不能合成西索米星,而工程菌PTI886仍能继续合成西索米星,且代谢产物组分与野生型菌株TS388相比无明显变化,说明genP基因能在依纽小单孢菌中表达。本研究揭示了同工异源酶基因异源表达的可行性,可为今后不同微生物异源基因组合的研究提供借鉴。
【作者单位】： 福州大学生物科学与工程学院;
【关键词】： 组合生物合成 genP基因 sisI基因 异源表达 ' '-双脱羟基
【基金】：国家自然科学基金项目(31070093)
【分类号】：Q78
【正文快照】： 氨基糖苷类抗生素是良好的抗菌药物,而且具有潜在的治疗人体免疫缺陷[1]和消除抗药性质粒功能[2_3]。氨基糖苷类抗生素的抗菌机制是通过与细菌核糖体16S rRNA上的A位点结合,使核糖体和mRNA无法正常结合,导致细菌蛋白质合成过程受阻,从而杀死或抑制病原菌[4]。根据该类抗生素的

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本文编号：665731