三穗麻鸭行为及DRD4、5-HT1A基因多态性研究

发布时间：2017-08-15 01:28

  本文关键词：三穗麻鸭行为及DRD4、5-HT1A基因多态性研究

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【摘要】：为探讨三穗鸭在笼养模式下的行为习性,解决动物福利和生产之间的矛盾,合理开发利用本优良品种,本实验从行为学、生理学和遗传学角度,对涉及三穗鸭行为方面的相关参数进行进行了较为全面的分析。行为学研究采用Media Record软件对笼养三穗鸭的雏鸭、中鸭、成鸭行为进行跟踪记录,运用Observer XT(11.5)行为学软件对行为进行定义,制成三穗鸭鸭行为谱,将行为分为休息、运动、修饰、理羽、警戒、攻击、饮水、采食、其他等并将部分行为制成模式图。对行为日节律、行为转换关系及时间分配等进行了研究。生理学研究采用酶联免疫测定的方法,以斑嘴野鸭和骡鸭作对照,对三穗鸭进行上笼应激,测定皮质酮浓度在上笼一周内的变化规律和行为反应。遗传学研究以50只三穗鸭为研究对象,利用混合DNA池法,采用PCR扩增并采用直接测序技术对DRD4、5-HT1A基因进行SNP多态位点检测,并进行生物信息学分析。本实验研究结果如下:1.行为分析结果表明,三穗鸭白天主要以卧立、站立行为为主,其次是理羽行为,中鸭时期的理羽行为所占比例最高,为5.65%,雏鸭和成鸭的理羽行为各为1.54%、1.29%。饮水行为发生的比例在雏鸭、中鸭、成鸭各是1.88%、1.98%、1.69%,次之的行为是行走行为,在雏鸭、中鸭、成鸭中所占比例分别是1.17%、0.88%、0.64%,其他的行为所占比例较少。三穗鸭行为在不同时期具有差异性,雏鸭阶段摆尾的舒展行为与成鸭阶段差异性显著,中鸭与成鸭差异性也显著,且全身抖动、腹部理羽、全身伸展、摩擦行为均与中鸭阶段呈现差异性(P0.05,均值差值在05级别上)。尾部和背部的理羽行为在中鸭和成鸭时期具有显著差异性等。三穗鸭不同时期日节律变化表明采食与饮水行为在3个成长阶段都是在8:00-9:00出现高峰值,3个时期的理羽、采食、饮水、探究行为都具有明显的节律变化,但不同的行为在不同时期的变现规律不同。各个行为之间的逻辑紧密度转换关系表明,卧立无折腿行为与翅膀拍打、摆尾行为;理羽行为与全身伸展和其他一些行为呈显著负相关(R=-0.986,P0.05;R=-0.981,P0.05;R=-0.982,P0.05)。卧立无折腿行为与低头呈极显著负相关(R=-0.981,P0.01)。全身伸展与摆尾、嬉戏与连续点头、摩擦与摆头、翅膀拍打与低头和其他一些行为都呈显著正相关(R=0.957,P0.05;R=0.952,P0.05;R=0.976,P0.05;R=0.981,P0.05)。全身伸展与摆尾、爪抓与警戒、站立双腿与翅膀拍打都是极显著正相关(R=1.000,P0.01;R=0.999,P0.01;R=0.990,P0.01)。2.上笼应激分析结果表明,上笼应激后3种鸭皮质酮水平较地面散养仅有轻微升高,无显著差异(P0.05)。三穗鸭不同性别对上笼应激皮质酮反应,差异不显著(P0.05)。应激后,一周内皮质酮浓度变化呈先升高后下降到正常水平;鸭子表现出严重的恐惧与不安情绪,饮水和采食有所减少。3.基因多态性分析显示,5-HT1A基因在951bp处发现了一个多态位点,发生C→T突变,命名为exon-C951T。DRD4基因共筛查出4个SNP位点:exon2-C12406T、exon3-A13144G、intron2-C12777T、intron2-T12789C。其中exon2-C12406T、exon3-A13144G位点突变为同义突变。对DRD4进行生物信息学分析表明,突变前后的等位基因频率估算有差异,但其mRNA二级结构预测,蛋白质二级、三级结构预测分析均无差异。
【关键词】：三穗鸭 行为 笼养 应激 皮质酮 5-HT1A DRD4 多态性
【学位授予单位】：贵州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S834
【目录】：

• 摘要8-10
• Abstract10-13
• 第一章 文献综述13-25
• 1 前言13-14
• 2 三穗鸭简介14-15
• 3 鸭行为简介15-17
• 3.1 行为学简介15
• 3.2 国外鸭行为学研究简介15-16
• 3.3 国内鸭行为学研究简介16-17
• 3.4 结语17
• 4 应激研究17-19
• 4.1 应激概念17-18
• 4.2 应激对动物内分泌系统的影响18
• 4.3 应激对动物内分泌系统的影响18-19
• 5 DRD4、5-HT1A受体基因研究进展19-22
• 5.1 DRD4基因研究进展19-21
• 5.2 5-HT1A基因研究进展21-22
• 6 生物信息学简介22-24
• 6.1 生物信息数据库22
• 6.2 生物信息学研究内容22-23
• 6.3 生物信息学应用23-24
• 7 本研究的目的与意义24-25
• 第二章 三穗鸭行为研究25-59
• 1.实验材料与方法25-28
• 1.1 实验动物及饲养25
• 1.2 实验方案25-26
• 1.3 实验行为定义26-28
• 1.4 实验数据分析28
• 2. 结果与分析28-53
• 2.1 鸭生长不同时期各行为时间介绍28-33
• 2.1.1 三穗鸭雏鸭各行为时间介绍28-30
• 2.1.2 三穗鸭中鸭各行为时间介绍30-31
• 2.1.3 三穗鸭成鸭各行为时间介绍31-33
• 2.2 鸭生长不同时期主要行为活动分配33-34
• 2.3 三穗鸭生长不同时期主要行为对比分析34-36
• 2.4 鸭生长不同时期各行为日活动节律36-39
• 2.5 三穗鸭各行为组内的行为转换关系39-46
• 2.6 三穗鸭各个行为之间的相关性46-51
• 2.7 三穗鸭延迟序贯综合分析51-52
• 2.8 三穗鸭特定行为介绍52-53
• 3. 结果讨论53-59
• 3.1 行为时间分配53-54
• 3.2 行为日节律变化54-55
• 3.3 不同生长时期行为对比55-56
• 3.4 各个行为之间关联分析56
• 3.5 应激行为和特定行为56-59
• 3.5.1 张嘴行为56-57
• 3.5.2 警戒行为57
• 3.5.3 刻板行为57-59
• 第三章 三穗鸭上笼应激皮质酮浓度变化59-65
• 1.实验材料与方法59-61
• 1.1 实验材料59
• 1.2 上笼应激模式的建立59
• 1.3 血浆皮质酮浓度测定59-60
• 1.4 数据分析60-61
• 2.结果与分析61-63
• 2.1 上笼一周血浆皮质酮浓度分析61
• 2.2 上笼一周血浆皮质酮浓度变化分析61-62
• 2.3 上笼应激行为变化62-63
• 3 讨论63-65
• 第四章 三穗鸭DRD4、5-HT1A基因多态性分析65-82
• 1.实验材料65-67
• 1.1 实验动物样本65
• 1.2 主要试剂65
• 1.3 溶液配制65-66
• 1.4 实验仪器66-67
• 2.实验方法67-73
• 2.1 DNA提67
• 2.2 DNA浓度和纯度的检测67-68
• 2.3 DNA池的构建68
• 2.4 基因引物设计68-69
• 2.5 PCR扩增69-70
• 2.6 PCR产物回收70-72
• 2.7 基因克隆72
• 2.8 基因克隆筛选72-73
• 2.9 基因克隆测序73
• 2.10 基因序列生物信息学分析73
• 3. 结果与分析73-80
• 3.1 基因组DNA提取结果73-74
• 3.2 PCR扩增结果74
• 3.3 基因序列分析74-75
• 3.4 DRD4基因SNPs等位基因频率估算75-76
• 3.5 DRD4基因mRNA二级结构分析76-77
• 3.6 DRD4的蛋白质理化特性分析77-78
• 3.7 DRD4蛋白质二级结构分析78-79
• 3.8 DRD4蛋白质三级结构分析79-80
• 4.讨论80-82
• 4.1 DRD4基因多态性80
• 4.2 5-HT1A基因多态性80-82
• 第五章 结论与展望82-83
• 1.结论82
• 2.展望82-83
• 致谢83-84
• 参考文献84-97
• 附录97-100

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本文编号：675696