应用TALEN技术定点突变水稻苯达松抗性基因CYP81A6

发布时间：2017-08-21 17:13

  本文关键词：应用TALEN技术定点突变水稻苯达松抗性基因CYP81A6

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【摘要】：基因打靶技术可以定向改变细胞或生物遗传信息,正逐步成为功能基因组学研究的重要分子生物学手段。其中,类转录激活因子效应物核酸酶(transcription activator-like effector nuclease,TALEN)技术已在多个农作物中实现基因的定点修饰,其已成为作物分子育种一种有效的技术手段。本研究利用TALEN技术,将水稻(Oryza sativa)基因组中已知的苯达松(bentazone)抗性基因CYP81A6进行定点突变,以创制苯达松敏感突变体育种材料。通过农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导转化粳稻品种武运粳7号(Oryza sativa subsp.japonica‘Wuyunjing 7’)愈伤,共获得110株T0水稻阳性转化苗,利用改良的PCR模板快速制备方法并结合高分辨率溶解曲线(high resolution melting,HRM)检测技术筛选T0代阳性植株,获得3株CYP81A6基因突变体材料,定点突变效率约为2.73%。基因测序分析及田间测试结果表明3株材料存在不同形式的基因序列变异,且均为嵌合体材料。对T1代群体继续进行苯达松敏感测试,发现该群体仍会出现大量的苯达松敏感植株,但未能筛选到纯合突变体。本研究虽未能获得稳定遗传的苯达松敏感基因纯合水稻突变体材料,但为下一步优化试验方案及继续筛选突变体积累了丰富的经验。
【作者单位】： 首都师范大学生命科学学院;深圳市作物分子设计育种研究院/深圳市分子设计育种重点实验室;深圳兴旺生物种业有限公司;
【关键词】： TALEN 水稻 苯达松 定点突变 嵌合体
【基金】：广东省引进创新科研团队计划资助项目(No.201001S0104725509) 深圳市技术开发项目(No.CXZZ20140411140647863) 深圳市农业科技成果转化资金项目(No.NYKJ20140922151049440) 深圳市农业发展专项(No.201405132333007970)
【分类号】：S511
【正文快照】：

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本文编号：714108