半滑舌鳎孕酮受体膜组分1基因的克隆及组织和时空表达规律
本文关键词:半滑舌鳎孕酮受体膜组分1基因的克隆及组织和时空表达规律
【摘要】:运用同源克隆和RACE方法获得了半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)孕酮受体膜组分1(PGRMC1)的c DNA全长序列,生物信息学分析显示,半滑舌鳎PGRMC1 c DNA序列全长1335 bp,开放阅读框长546 bp;其编码的蛋白是单次跨膜蛋白,在N端13~35位氨基酸残基处有一个跨膜区域。半滑舌鳎PGRMC1氨基酸序列与青溕(Oryzias latipes)相似性最高,达到了82.9%;与青斑河渶(Tetraodon nigroviridis)相似度为81.2%。系统进化分析表明,半滑舌鳎PGRMC1与溕形目和渶形目鱼类PGRMC1聚为一个分支。采用实时荧光定量RT-PCR技术研究发现,性成熟雌性半滑舌鳎PGRMC1 m RNA在各组织广泛表达,其中在卵巢组织中相对表达量最高(P0.05)。在不同卵巢发育时期,半滑舌鳎PGRMC1 m RNA在脑、垂体和卵巢中的周期表达变化特征显示:脑中PGRMC1 m RNA在卵巢Ⅲ期表达量升高明显,Ⅴ期表达水平最高(P0.05);垂体中PGRMC1 m RNA表达量在卵巢发育Ⅴ期达峰值(P0.05);在卵巢中,PGRMC1 m RNA表达水平从卵巢发育Ⅱ到Ⅴ期稳步上升,Ⅴ期时达到最高值(P0.05)。综上,半滑舌鳎PGRMC1基因主要参与卵巢的发育和成熟过程,并在繁殖期介导孕酮调控卵母细胞的最终成熟,研究结果为半滑舌鳎繁殖内分泌调控研究提供了基础资料。
【作者单位】: 大连海洋大学水产与生命学院;农业部海洋渔业可持续发展重点实验室中国水产科学研究院黄海水产研究所;青岛海洋科学与技术国家实验室海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室;
【关键词】: 半滑舌鳎 PGRMC基因 克隆 表达分析
【基金】:国家自然科学基金项目(31201982) 山东省优秀中青年科学家科研奖励基金项目(BS2013SW042) 国家鲆鲽类产业技术体系项目(CARS-50)
【分类号】:S917.4
【正文快照】: 孕酮受体膜组分(progesterone membrane receptorcomponents,PGRMCs)属于小分子蛋白。目前在脊椎动物中已鉴定出了两种PGRMCs亚型(PGRMC1和PGRMC2),二者均属于膜相关孕激素受体家族成员,其中研究较多的是PGRMC1。在所有哺乳动物、无脊椎动物直系同源蛋白和酵母中,PGRMC1蛋白均
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