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树舌灵芝免疫调节蛋白基因克隆,生物信息学分析及真核表达载体构建

发布时间:2017-08-24 14:33

  本文关键词:树舌灵芝免疫调节蛋白基因克隆,生物信息学分析及真核表达载体构建


  更多相关文章: 树舌灵芝 真菌免疫调节蛋白 生物信息学分析 染色体步移 基因克隆 真核表达


【摘要】:树舌灵芝(Ganoderma applanatum)为灵芝属内独特的一类,克隆树舌灵芝免疫调节蛋白(fungal immunomodulatory protein,FIP)基因,对其进行生物信息学分析并构建真核表达载体,将为高效表达重组树舌灵芝FIP和揭示其生物学功能奠定基础。采用染色体步移的方法从树舌灵芝菌丝体基因组DNA中扩增得到1个新型真菌免疫调节蛋白基因—FIP-gap,对其核苷酸序列进行生物信息学分析,结果表明,FIP-gap基因属于灵芝属FIP家族,含有342 bp,编码113个氨基酸。对其氨基酸序列分析表明:树舌灵芝免疫调节蛋白FIP-gap分子量为12.7 k D,理论等电点为4.93,富含丝氨酸,缬氨酸和苏氨酸,不含组氨酸和半胱氨酸。另外将FIP-gap与其他灵芝属FIP进行蛋白质序列比对分析,其具有FIP典型的保守序列,并与灵芝(G.lucidum)、松杉灵芝(G.tsugae)、紫灵芝(G.japoncium)、紫芝(G.sinensis)、小孢子灵芝(G.microsporum)和黑灵芝(G.atrum)具有78%、78%、78%、79%、78%和77%的同源性,为一新型的FIP。构建灵芝属真菌免疫调节蛋白系统进化树,结果表明树舌灵芝FIP-gap与其他灵芝属FIP均不聚类,说明其与其他灵芝属FIP的亲缘性相对较远。同时,构建了毕赤酵母重组表达载体p PIC9-FIP-gap,为进一步研究FIP-gap的生物学功能提供基础,为全面了解真菌免疫调节蛋白提供理论依据。
【作者单位】: 沈阳农业大学园艺学院;沈阳农业大学生物科学技术学院;
【关键词】树舌灵芝 真菌免疫调节蛋白 生物信息学分析 染色体步移 基因克隆 真核表达
【基金】:中国博士后科学基金项目(2013M541251)
【分类号】:S567.31
【正文快照】: 树舌灵芝属于灵芝属(Ganoderma),多孔菌目(Polyporus),担子菌纲(Basidiomycetes),俗称扁灵芝,老牛肝,是一种重要的大型药用真菌[1]。树舌灵芝具有和灵芝相似的功能药效,如提高机体免疫力和抗肿瘤等,而在某些生物学功能上例如提高记忆力甚至优于灵芝[2]。当前对树舌灵芝的开发

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1 李忠谱;野生活树树舌与栽培灵芝药效比较研究[J];中国食用菌;1994年02期

2 刘中华;侯小歌;裴文亮;吕瑞峰;杜虎军;;树舌灵芝发酵特性的研究[J];中国酿造;2010年10期

3 黄达明;李欣;黄,

本文编号:731845


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