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共表达PCV2 ORF2和猪IL-18基因的重组猪伪狂犬病毒对小鼠的免疫原性

发布时间:2017-08-27 05:20

  本文关键词:共表达PCV2 ORF2和猪IL-18基因的重组猪伪狂犬病毒对小鼠的免疫原性


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【摘要】:【目的】研制猪伪狂犬病毒(PRV)和猪圆环病毒2型(PCV2)的二联活疫苗,并用猪IL-18作为免疫佐剂。【方法】将猪IL-18基因插入到质粒p GO中,获得的重组转移质粒p GO18与猪PRV弱毒HB98株DNA共转染ST细胞,并进行空斑筛选和纯化;RT-PCR和Western blot分别从转录和蛋白水平鉴定其表达情况。将重组病毒PGO18和PGO、PRV弱毒株HB98、PCV2灭活商品苗和1640细胞培养基分别免疫6周龄雌性昆明小鼠,4周后二次免疫,二免后4周用PCV2 DF强毒和PRV Min/A强毒接种小鼠。通过ELISA、血清中和试验和流式细胞术及攻毒保护试验评价重组病毒的免疫原性。【结果】获得了重组病毒PGO18,并且可在ST细胞内表达;PGO18可诱导小鼠机体产生PCV2的ELISA和PRV的中和抗体水平,刺激CD3+、CD4+、CD8+T细胞亚群的增殖,且能有效抵抗PCV2和PRV强毒攻击。【结论】IL-18基因可增强重组病毒的免疫效果,使重组病毒具有良好的免疫原性,有望成为防治PCV2和PRV的候选疫苗株。
【作者单位】: 河南农业大学郑州市猪重大疫病防控重点实验室;河南省动物疫病预防控制中心;
【关键词】PCV ORF IL- 重组伪狂犬病毒 免疫效力
【基金】:河南省产学研项目(132107000002) 河南省基础与前沿技术研究计划项目(142300410156) 河南省教育厅科学技术研究重点项目(14A230002)~~
【分类号】:S852.4
【正文快照】: 断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)主要由猪圆环病毒2型(PCV2)引起,PCV2还与多种疾病相关,统称为猪圆环病毒病。主要感染猪的皮肤和粘膜组织,导致相应部位上皮组织发生增生性病变,还可加重猪呼吸和繁殖障碍综合征病毒和猪细小病毒等感染。现已确认猪圆环病毒病在全世界都有发生,

【参考文献】

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本文编号:744578

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