番木瓜诱导型基因CpPGIP2启动子的克隆与分析

发布时间：2017-08-29 14:00

  本文关键词：番木瓜诱导型基因CpPGIP2启动子的克隆与分析

  更多相关文章： 番木瓜 多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白 启动子 调控元件 载体构建

【摘要】：【目的】获得诱导型基因Cp PGIP2启动子,并分析该启动子的功能。【方法】以番木瓜Cp PGIP2基因c DNA序列(HQ660394)搜索番木瓜基因组DNA序列,获得一段约2 000 bp的5’端上游DNA序列(ABIM01005077),参照该序列设计PCR特异引物,以番木瓜叶片DNA为模板克隆该启动子,并进行生物信息学分析。将3个启动子片段替换p CAMBIA1301载体中的Ca MV 35S启动子,构建缺失启动子表达载体,以GUS瞬时表达检测缺失启动子表达活性。【结果】获得了Cp PGIP2起始密码子上游长为1 981 bp的调控序列,经分析该序列含有真菌、脱落酸、赤霉素、光照等多种响应元件,为诱导型启动子。构建了1个启动子全长表达载体和2个5’端缺失启动子表达载体,分别命名为p D0-1981、p D1-1204和p D2-261。启动子在番木瓜果肉中的瞬时表达显示,长度为1 204 bp的启动子表达活性最强。并且,该启动子在根、茎、叶、果肉和愈伤组织中均有不同程度的表达,在近外果皮的果肉处和根部表达最明显。【结论】本研究获得了Cp PGIP2启动子序列,确定了表达活性最强的启动子长度,初步分析了启动子的表达模式和顺式作用元件,为进一步深入研究Cp PGIP2基因功能以及将该启动子应用于植物基因工程育种奠定了基础。
【作者单位】： 福建农林大学园艺学院·园艺植物遗传育种研究所;
【关键词】： 番木瓜 多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白 启动子 调控元件 载体构建
【基金】：福建农林大学园艺学院青年学术骨干培养基金(FAFU2012YYPY05) 福建省自然科学基金资助项目(2010J05048)
【分类号】：S667.9
【正文快照】： 1204 vector can also express GUS in the root,stem,leaf,and callus of the papaya.The expression in theroot and the fruit were higher than the other tissues.【Conclusion】With the availability of a number ofplant genome sequences,it has become relatively e

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 申艳红;陈晓静;李荣荣;卢秉国;何玮毅;;2个番木瓜多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白基因的克隆与分析[J];热带作物学报;2011年05期

2 王莹;韩烈保;曾会明;;高等植物启动子克隆方法的研究进展[J];生物技术通报;2007年03期

【共引文献】

中国博士学位论文全文数据库 前3条

1 蒋昌华;月季RcHSP17.8基因克隆与功能研究[D];复旦大学;2008年

2 李燕;紫花苜蓿诱导表达启动子MsZPP的克隆及功能分析[D];中国农业科学院;2012年

3 黄兆峰;田旋花对草甘膦耐药性分子机制[D];中国农业科学院;2014年

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 齐春辉;韩烈保;梁小红;曾会明;刘君;;以基因枪法转化日本结缕草获得转基因植株[J];北京林业大学学报;2006年03期

2 夏江东,夏平;高等植物启动子功能和结构研究进展[J];楚雄师范学院学报;2005年03期

3 申艳红;陈晓静;;改良热硼酸小量法提取番木瓜果肉总RNA[J];中国南方果树;2009年02期

4 申艳红;陈晓静;何玮毅;卢秉国;;番木瓜肌动蛋白CpActin基因的克隆及其在果肉中的表达[J];果树学报;2010年06期

5 蒋浩,秦红敏,田颖川,DeanW.Gabriel;杨树皮储藏蛋白基因启动子的克隆和功能研究[J];林业科学;1999年05期

6 李增平;番木瓜果实腐烂病原菌、防腐及贮藏[J];热带农业科学;2000年01期

7 李竹红,刘德培,梁植权;改进的反向PCR技术克隆转移基因的旁侧序列[J];生物化学与生物物理进展;1999年06期

8 彭仁旺,周雪荣,周奕华,方荣祥,莽克强;烟草花药特异表达基因启动子的克隆及序列分析[J];生物工程学报;1996年03期

9 李维,张义正;黄孢原毛平革菌基因启动子的分离与鉴定[J];生物工程学报;2000年05期

10 皮灿辉,易自力,王志成;提高转基因植物外源基因表达效率的途径[J];中国生物工程杂志;2003年01期

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 郝迪，

本文编号：753643