干扰PTEN基因表达影响人正常胃黏膜上皮细胞系GES-1增殖和凋亡

发布时间：2017-08-30 15:18

  本文关键词：干扰PTEN基因表达影响人正常胃黏膜上皮细胞系GES-1增殖和凋亡

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【摘要】：目的:探讨PTEN对体外培养的人胃黏膜上皮细胞系GES-1增殖凋亡的影响及其磷酸化通路研究。方法:体外培养GES-1细胞,构建针对PTEN基因的shRNA慢病毒载体,感染GES-1细胞系,干扰PTEN的表达,实验分为空白对照组、慢病毒阴性对照组和干扰PTEN实验组;荧光显微镜、实时荧光定量PCR和免疫印迹法检测其感染效率;CCK8测定GES-1细胞的增殖,流式细胞术测定细胞的周期和凋亡;实时荧光定量PCR检测GES-1的PTEN、Akt、ERK的mRNA表达水平;Western blot检测GES-1的Akt和磷酸化Akt(p-Akt),ERK1/2及磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)表达。结果:干扰PTEN的慢病毒成功感染GES-1,降低了PTEN基因的转录和翻译水平。与空白对照组相比,PTEN表达降低后使G0/G1期的细胞比率减低,而G2/M和S期细胞比率增高,同时凋亡细胞减少,促进GES-1的增殖而抑制其凋亡。p-Akt和p-ERK1/2表达显著上调(P0.05),而对GES-1的Akt和ERK的mRNA及总蛋白表达没有影响(P0.05)。结论:抑癌基因PTEN可以通过促进Akt和ERK的磷酸化,调节GES-1细胞下游的相关凋亡和信号通路,进而调节GES-1的增殖和凋亡。
【作者单位】： 重庆三峡医药高等专科学校;重庆市抗肿瘤天然药物工程技术研究中心;重庆三峡中心医院;
【关键词】： PTEN GES- Akt ERK/ 增殖 凋亡
【基金】：重庆市教委科技计划项目(编号:KJ111804)
【分类号】：R730.2
【正文快照】： 近年来,信号通路成为了肿瘤研究的一大热点,尤其是与肿瘤发生发展密切相关的Akt和ERK通路。Akt又称为蛋白激酶B(PKB),磷酸化的Akt(p-Akt)是其活化形式,并在PI3K/Akt/mTOR/p70S6K通路起重要作用,与肿瘤细胞增殖凋亡分化,血管新生和转移等多种生物学功能密切相关。ERK即细胞外信

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本文编号：760041