三种出血热病毒的荧光基因芯片检测方法的建立
本文关键词:三种出血热病毒的荧光基因芯片检测方法的建立
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【摘要】:为建立可同时检测新疆出血热病毒(CCHFV)、裂谷热病毒(RVFV)、拉沙病毒(LSV)的荧光基因芯片,分别针对CCHFV和RVFV的S基因、LSV的NP基因,应用生物学软件设计了3对引物与6条探针。运用多重PCR扩增和标记目的片段,将其与基因芯片杂交,最后扫描分析结果。分别对杂交温度与杂交时间进行条件优化,最后对基因芯片的特异性、敏感性和重复性进行评估。结果显示,设计的所有探针都可以与目的片段特异性杂交,探针1a与1b可检测到CCHFV,探针2a与2b可检测到RVFV,探针3a与3b可检测到LSV。相比多重PCR,荧光基因芯片检测CCHFV的灵敏度提高了10倍,检测RVFV的灵敏度提高了100倍,检测LSV的灵敏度提高了100倍。结果表明,本试验建立的同时检测3种出血热病毒的荧光基因芯片检测方法特异性高、敏感性强,可用于这3种病毒的快速检测与甄别。
【作者单位】: 广西大学动物科学技术学院;军事医学科学院军事兽医研究所;
【关键词】: 新疆出血热病毒 裂谷热病毒 拉沙病毒 多重PCR 荧光基因芯片
【基金】:国家科技支撑计划项目(2010BAD04B02) 公益性行业(农业)科研专项(201203082)
【分类号】:S852.65
【正文快照】: 克里米亚-刚果出血热(Crimean-Congo hemor-rhagic fever,CCHF)又名新疆出血热,是一种由克里米亚-刚果出血热病毒(CCHFV)经蜱传播的烈性传染病。该病毒是布尼亚病毒科、内罗病毒属的分节段单股负链RNA病毒。家畜是蜱的主要血缘动物,人可以通过带毒蜱叮咬或接触感染的家畜而感
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,本文编号:768873
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