琥珀酰明胶过敏与HLA-A、HLA-B基因多态性关系的研究

发布时间：2017-09-06 04:00

  本文关键词：琥珀酰明胶过敏与HLA-A、HLA-B基因多态性关系的研究

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【摘要】：目的:通过检测围术期琥珀酰明胶过敏患者人类白细胞抗原(HLA)基因型中HLA-A和HLA-B等位基因携带频率,研究HLA-A和HLA-B基因多态性与琥珀酰明胶过敏的相关性,探索其规律,为进一步进行大样本研究奠定基础,并对预防琥珀酰明胶过敏提供新的思路。方法:实验组选取2014年12月至2016年1月在郑州大学第一附属医院行手术治疗并在围术期发生琥珀酰明胶(佳乐施)疑似过敏的病人,分别取患者发生相关临床症状后1小时、24小时静脉血2ml,并提取血清,ELISA法测定血清类胰蛋白酶水平,对比症状发作期与症状控制期血清类胰蛋白酶水平差异,最终纳入12例对琥珀酰明胶过敏的病人。1.取200μl静脉血提取全血DNA,检测所提取的DNA浓度和纯度。2.采用传统的特异性寡核苷酸探针分析法(PCR-SSO),与流式细胞技术相结合的方法,通过计算得到样本的HLA基因型,采取直接计数法计数HLA-A、HLA-B基因型,与人类MHC数据库中572位健康的中国汉族人群对照,比较等位基因携带者频率的差异。3.以人类MHC数据库中572位健康的中国汉族人群为对照,围术期琥珀酰明胶过敏分级Ⅱ级以上患者,对比两组HLA等位基因的携带者频率。琥珀酰明胶疑似过敏反应的诊断标准:应用琥珀酰明胶后,数分钟或数小时内出现至少以下2种或以上临床症状者:(1)皮肤反应,例如皮肤潮红、斑丘疹及荨麻疹等;(2)呼吸系统症状,例如支气管痉挛及低氧血症等;(3)血压下降及相关症状,例如休克、晕厥等;(4)持续的胃肠道症状,例如胃肠道痉挛,呕吐等。根据临床表现将过敏反应分为4级:I级,仅表现为皮肤潮红、出现斑丘疹和荨麻疹;II级,出现皮肤症状外,低血压、心动过速;呼吸困难和胃肠道症状;III级,出现皮肤症状;心动过速或心动过缓和心律紊乱;支气管痉挛及胃肠功能紊乱;Ⅳ级,心脏停搏。Ⅱ级以上(不包括Ⅱ级)定义为严重过敏反应。结果:1.12例琥珀酰明胶过敏病人血样中提取DNA的浓度、纯度均达标。2.以人类MHC数据库中572例健康中国汉族人群为对照,围术期琥珀酰明胶过敏患者HLA-A*01:01携带者频率高于正常对照组(0.17:0.02,P0.05);HLA-A*11:01携带者频率低于正常对照组(0.17:0.49,P0.05);HLA-B*44:02携带者频率高于正常对照组(0.25:0.00,P0.001);HLA-B*46:01携带者频率高于正常对照组(0.17:0.01,P=0.02);其余等位基因在琥珀酰明胶过敏病人和正常对照组中,差异无统计学意义。3.以人类MHC数据库中572位健康的中国汉族人群为对照,围术期琥珀酰明胶过敏分级Ⅱ级以上患者HLA-A*31:01携带者频率高于正常对照组(0.33:0.04,P=0.02);HLA-B*44:02携带者频率高于正常对照组(0.50:0.00,P0.001);HLA-B*46:01携带者频率高于正常对照组(0.33:0.01,P0.001);其余等位基因在琥珀酰明胶过敏病人和正常对照组中,差异无统计学意义。结论:围术期对琥珀酰明胶严重过敏的病人HLA-A*31:01、HLA-B*44:02和HLA-B*46:01三个等位基因携带率分别为33.3%、50.0%和33.3%,明显高于正常对照组,提示这三个等位基因可能与琥珀酰明胶严重过敏相关,可能是围术期发生琥珀酰明胶严重过敏反应的易感基因。
【关键词】：琥珀酰明胶 过敏 人类白细胞抗原 基因多态性
【学位授予单位】：郑州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R614
【目录】：

• 摘要4-6
• Abstract6-9
• 缩略词表9-10
• 前言10-13
• 材料和方法13-19
• 结果19-24
• 讨论24-29
• 结论29-30
• 参考文献30-33
• 综述 HLA基因多态性与过敏反应及过敏性疾病的关系33-44
• 参考文献41-44
• 个人简历、在学期间发表论文44-45
• 致谢45

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本文编号：802021