中华绒螯蟹MIH基因的原核表达及其外源重组蛋白对内源性基因表达的影响

发布时间：2017-09-09 03:44

  本文关键词：中华绒螯蟹MIH基因的原核表达及其外源重组蛋白对内源性基因表达的影响

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【摘要】：蜕皮抑制激素(molt inhibiting hormone,MIH)对甲壳动物的蜕壳生长起着至关重要的调控作用。本研究通过优化MIH基因的原核表达条件,获得其外源重组蛋白,研究了外源重组蛋白注射到中华绒螯蟹(Eriocheir sienesis)体内后,对眼柄中内源性MIH基因表达的影响。结果发现,构建的重组表达质粒(p ET-28a-MIH)在27℃条件下用1.0 mmol/L的异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropy-β-Dthiogalactopyranoside,IPTG)诱导6 h,目的蛋白表达量最高,此为该基因的原核表达优化条件。进而将MIH重组蛋白注射到活体中华绒螯蟹,发现注射4 h后在眼柄中的内源MIH表达水平显著高于8、24 h和空白对照组,表明外源性MIH重组蛋白只能在短时期内对内源性MIH表达有促进作用,从而会在一定程度上抑制中华绒螯蟹的蜕壳。研究结果为中华绒螯蟹的蜕壳机制研究和后续的抗体制备提供了基础资料。
【作者单位】： 上海海洋大学农业部淡水水产种质资源重点实验室;
【关键词】： 中华绒螯蟹 蜕皮抑制激素(MIH) 原核表达 条件优化 基因表达
【基金】：上海市中华绒螯蟹产业技术体系项目(沪农科(产)字2015-4号) 上海市科委崇明科技专项项目(No.13391912102) 上海市工程技术中心建设项目(No.03DZ2251800)
【分类号】：S917.4
【正文快照】： 蜕皮抑制激素(molt inhibiting hormone,MIH)是由位于甲壳动物眼柄中的X器——窦腺复合体(X-organ sinus gland,XO-SG)所分泌的一种激素,主要通过抑制Y-器官合成及分泌蜕皮激素来达到抑制蜕壳的作用(Hopkins,2009;Nakatsuji et al.,2006;Stewart et al.,2013)。有研究报道,MIH

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