外源性S100A6蛋白对人结直肠癌细胞S100A6基因转录的影响及机制探讨
本文关键词:外源性S100A6蛋白对人结直肠癌细胞S100A6基因转录的影响及机制探讨
【摘要】:目的:探讨钙周期蛋白S100A6对人结直肠癌细胞系HCT116及SW480中S100A6基因转录的影响及机制。方法:首先采用原核表达方法制备重组人S100A6蛋白(recombinant human S100A6,rh S100A6)并鉴定;rh S100A6蛋白(终浓度为10μg/ml)、重组腺病毒Adsiβ-catenin(可表达β-catenin的siRNA)处理结直肠癌细胞HCT116、SW480及正常肠上皮细胞FHC,采用半定量反转录聚合酶链反应(reverse transcription and polymerase chain reaction,RT-PCR)及定量实时聚合酶链反应(quantitative real time polymerase chain reaction,q PCR)检测S100A6 mRNA的水平,采用RT-PCR检测细胞中E-cadherin mRNA水平,采用Western blot检测并比较HCT116及SW480细胞核中β-catenin蛋白的水平变化,采用细胞免疫荧光法检测细胞中β-catenin分布的变化。结果:成功制备rh S100A6蛋白;外源性rh S100A6蛋白上调HCT116及SW480细胞中S100A6 mRNA水平和细胞核中的β-catenin蛋白水平并促进β-catenin发生核移位,同时下调细胞中E-cadherin mRNA水平;Adsiβ-catenin与rh S100A6联合处理组的S100A6 mRNA水平明显低于单独rh S100A6处理组。所有差异均具有统计学意义。结论:胞外的S100A6蛋白增强结直肠癌细胞中S100A6基因的转录,其机制可能涉及β-catenin通路的激活。
【作者单位】: 重庆医科大学检验医学院临床检验诊断学教育部重点实验室;
【关键词】: 结直肠癌 SA β-catenin
【分类号】:R735.34
【正文快照】: 结直肠癌是一种常见的消化道恶性肿瘤,其发病率和死亡率分别位居全世界第三位和第四位,在我国也均呈逐年上升趋势,形势十分严峻[1]。当前,早期结直肠癌患者的治疗以外科手术切除为主,中晚期辅以放疗和化疗的综合治疗为主,但晚期患者5年生存率还是比较低。进一步研究结直肠癌发
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