葱蝇热激蛋白DaHSP23基因的克隆及在冬滞育和夏滞育蛹中的表达分析（英文）

发布时间：2017-09-20 05:18

  本文关键词：葱蝇热激蛋白DaHSP23基因的克隆及在冬滞育和夏滞育蛹中的表达分析（英文）

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【摘要】：【目的】低分子量(12~43 k Da)热激蛋白(s HSPs)具有抗逆应答的功能,滞育是昆虫抵抗不良环境的特殊发育形式,但s HSPs在昆虫滞育发育过程中的作用仍不清楚。本研究克隆和特征化葱蝇Delia antiqua sHSP基因,并研究它在夏滞育和冬滞育发育过程中的表达模式,为阐明s HSPs在滞育发育上的功能奠定基础。【方法】通过RACE-PCR方法克隆了葱蝇HSP23基因,通过相似性比较分析了其特征、结构域及与双翅目代表性同源基因的系统发育关系;采用实时荧光定量PCR研究了该基因在葱蝇冬滞育蛹和夏滞育蛹发育过程中的表达情况,通过表达的差异比较揭示了该基因与滞育发育的关系。【结果】克隆出了葱蝇HSP23基因,命名为Da HSP23(Gen Bank登录号:HQ392521.1),其cDNA全长序列为904 bp,编码186个氨基酸,推测蛋白分子量为20.9 kDa,等电点为6.42。该基因的编码蛋白与其他双翅目昆虫的sHSPs有超过66%的氨基酸序列一致性,与已报道的其他双翅目昆虫的滞育相关HSP23基因同源。基因组测序显示该基因无内含子。DaHSP23基因在葱蝇非滞育蛹的发育过程中一直保持在较低的水平,各发育阶段间的表达量不存在显著差异。但在冬滞育和夏滞育蛹中,该基因从滞育起始期开始逐渐显著升高表达,到滞育维持期的中后期达到峰值,在滞育终止期逐渐降到较低的水平。【结论】DaHSP23基因在葱蝇冬滞育和夏滞育发育过程中明显上调表达,但存在差异,它在滞育期的调控可能是种专化的。DaHSP23可能在葱蝇两种类型的滞育上起重要作用。
【作者单位】： 重庆师范大学昆虫与分子生物学研究所;
【关键词】： 葱蝇 滞育 热激蛋白 基因克隆 表达模式 实时荧光定量PCR
【基金】：“两江学者”计划专项经费(20136666) 国家自然科学基金项目(31372265) 国际原子能机构IAEA研究项目(18268/R2) 科技基础性工作专项重点项目(2015FY210300) 重庆市教委科学技术研究项目(KJ1400517) 重庆师范大学青年基金项目(2011XLS33)
【分类号】：Q78;Q966
【正文快照】： 1 INTRODUCTION Heat shock proteins ( HSPs ) are conserved proteins involved in multiple cellular processes,including protein folding,targeting,and translocation across membranes ( Neupert,1997; Hartl and HayerHartl, 2002 ) . According to the homology an

【参考文献】

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3 李秉，

本文编号：886122