猪博卡病毒不同基因型三重PCR检测方法的建立及初步应用

发布时间：2017-09-20 20:45

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【摘要】：为鉴别猪博卡病毒1型、2型和3型3种基因型,根据猪博卡病毒基因序列分别设计3对针对保守区域的引物进行PCR扩增,扩增目的片段大小分别为645 bp(PBoV1型)、352 bp(PBoV2型)和259 bp(PBoV3型)。通过引物浓度和退火温度等条件优化,首次建立了同时检测猪博卡病毒3种基因型的三重PCR方法。所建立的三重PCR方法扩增其他猪病病毒结果均为阴性,最低检测限为8×10-7ng/μL。结果表明,该方法具有较好的特异性和敏感性。对临床样品进行三重PCR和单项PCR检测,对比结果显示符合率为100%。该方法的建立为猪博卡病毒3种不同基因型的鉴别检测提供了有效手段。
【作者单位】： 北京农学院动物科学技术学院;北京市农林科学院畜牧兽医研究所畜禽疫病防控技术北京市重点实验室;北京农业生物技术研究中心;
【关键词】： 猪博卡病毒 基因型 三重PCR 检测
【基金】：北京市农林科学院科技创新能力建设专项(KJCX20140409) 北京市科技计划项目(Z131100003113015)
【分类号】：S852.65
【正文快照】： 博卡病毒(Bocavirus)为细小病毒科、细小病毒亚科、博卡病毒属的成员。猪博卡病毒(Porcine bo-cavirus,PBo V)是2009年在患有仔猪断奶后多系统衰竭综合征的猪淋巴结中,通过随机置换扩增的方法和高通量测序技术在瑞典首次发现[1]。由于对PBo V的研究仍处于起步阶段,其单独的致

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