寄生于南方根结线虫卵的长梗木霉几丁质酶基因TlChi46的克隆

发布时间：2017-09-21 15:26

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【摘要】：为进一步筛选高效寄生线虫真菌和阐明其寄生线虫卵的机理,本研究从湖北省烟草南方根结线虫雌虫分离到1株具高效生防潜力的菌株HBF1。形态学、rDNA-ITS和翻译延长因子tef1-α序列分析鉴定该菌为长梗木霉菌Trichoderma longibrachiatum,其对南方根结线虫卵第10 d寄生率为80.45%。通过简并引物设计和RACE技术克隆其几丁质酶基因,分析该基因序列及与其他几丁质酶的同源性。该菌是1株可以产生几丁质酶的南方根结线虫卵寄生真菌,第10 d几丁质酶的活性达到高峰,为24.88μmol/h/mL。本研究首次从长梗木霉HBF1菌株中克隆到1个几丁质酶基因TlChi46,该基因DNA全长1 793 bp,含3个内含子和1个1 272 bp的开放阅读框,编码423个氨基酸,理论分子量45.9 kDa,等电点5.23。同源性比对表明和昆虫寄生菌几丁质酶的亲缘关系较远。从长梗木霉HBF1中克隆得到的几丁质酶基因编码的几丁质酶的功能域可供进一步研究,高效产几丁质酶并有效寄生南方根结线虫卵的长梗木霉对南方根结线虫具有良好的生防潜力。
【作者单位】： 青岛农业大学农学与植物保护学院山东省植物病虫害综合防控重点实验室;中国农业科学院烟草研究所;
【关键词】： 克隆 长梗木霉 南方根结线虫卵 寄生 几丁质酶基因
【基金】：中国烟草总公司资助项目(110200902065-4) 山东烟草专卖局资助项目(201001) 农业部科研项目(2130108) 山东省“泰山学者”建设工程专项
【分类号】：S432.45;S476.1
【正文快照】： 根结线虫(Meloidogyne spp.)病是世界范围内发生且寄主范围广泛的重要植物线虫病害[1]。化学杀线剂对环境造成严重污染,并且化学药剂的大量使用使植物寄生性线虫抗药性随之增强,防治效果降低。因此,开发具有生防作用的真菌和有潜力的生防因子备受关注。几丁质是由β-1,4-糖苷

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本文编号：895357