还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶-1基因重组真核表达质粒的构建及其对血管平滑肌细胞凋亡的影响

发布时间：2017-09-23 17:30

  本文关键词：还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶-1基因重组真核表达质粒的构建及其对血管平滑肌细胞凋亡的影响

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【摘要】：目的构建含人还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶-1(NOX1)基因重组真核表达质粒,探讨其对血管平滑肌细胞(VSMC)凋亡的影响。方法通过美国国家生物技术信息中心(NCBI)数据库查找NOX1基因的mRNA序列,针对蛋白质编码区(CDS)设计引物,以人c DNA为模板扩增出NOX1基因全长CDS序列,经双酶切鉴定后,将NOX1基因与真核表达载体pc DNA3.1(+)连接,再经双酶切、测序鉴定。运用脂质体转染重组体pc DNA3.1(+)-NOX1至VSMC中,观察NOX1表达及VSMC凋亡情况。结果重组体中NOX1基因片段和载体DNA大小与预期一致。经BLAST(the basic local alignment search tool)比对,与NCBI数据库中的NOX1基因序列具有高度的同源性。pc DNA3.1(+)-NOX1能促进VSMC中NOX1蛋白高表达,并促使VSMC的凋亡。结论 NOX1基因重组真核表达质粒能促使VSMC凋亡,为阐明NOX1在主动脉夹层中的作用及分子机制研究奠定了基础。
【作者单位】： 武汉大学人民医院心血管外科;
【关键词】： 主动脉夹层 氧化应激 还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶- 质粒 血管平滑肌细胞 细胞凋亡
【基金】：国家自然科学基金面上项目(编号:81570428) 中央高校基本科研业务费专项资金项目(编号:2042014kf0117) 湖北省自然科学基金面上项目(编号:2015CFB169)
【分类号】：R543.1
【正文快照】： 主动脉夹层(aortic dissection,AD)是一种病情凶险、进展快、病死率高的急性主动脉疾病[1]。如果未得到及时治疗,自夹层发生开始,病死率以每小时1%~3%递增;虽经药物治疗,24 h病死率仍高达20%,1周后病死率高达40%[2]。还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶-1(nicotinamide ade

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本文编号：906611