转杜仲几丁质酶基因EuCHIT1番茄提高对灰霉病的抗性

发布时间：2017-09-27 14:35

  本文关键词：转杜仲几丁质酶基因EuCHIT1番茄提高对灰霉病的抗性

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【摘要】：通过农杆菌介导法将杜仲几丁质酶基因EuCHIT1遗传转化‘Micro-Tom’番茄,经筛选和PCR鉴定获得38株转基因植株。对野生型和转EuCHIT1番茄几丁质酶活性、灰霉病抗性、保护酶活性以及病程相关蛋白基因表达水平等进行分析,结果表明,转EuCHIT1番茄植株几丁质酶活性为2 059.48 U·g~(-1)(FW),较野生型高62.14%,差异达到极显著水平。对野生型和转EuCHIT1番茄植株接种灰霉菌后,转EuCHIT1番茄发病时间比野生型推迟3 d。分别对未接种和接种灰霉菌6 d后的野生型和转EuCHIT1番茄SOD、POD、CAT活性和MDA含量分析表明,接菌前,转EuCHIT1番茄植株中POD活性为2 825.85 U·g~(-1)(FW),比野生型高48.63%;MDA含量为21.84 nmol·g~(-1)(FW),比野生型低28.25%;而SOD和CAT活性与野生型相比无显著差异。接菌后,转EuCHIT1番茄植株中SOD、POD和CAT活性分别为510.44、5 423.92和603.59 U·g~(-1)(FW),分别比野生型高19.48%、116.08%和53.80%;MDA含量为26.49 nmol·g~(-1)(FW),比野生型低37.65%。说明EuCHIT1基因表达增强了番茄植株的抗氧化能力,从而减少灰霉病对番茄的损伤。病程相关蛋白基因表达分析表明,接菌前,转EuCHIT1番茄中PR~(-1)a、PR-2和PR-5基因表达量均高于野生型,分别为野生型的2.23、11.69和1.80倍,PR-NP24表达量与野生型无显著差异;接菌后,转EuCHIT1番茄的PR~(-1)a、PR-2、PR-NP24和PR-5表达量均极显著高于野生型,分别是野生型的4.35、10.37、16.58和5.02倍。上述研究结果说明,转EuCHIT1基因番茄提高对灰霉病抗性,与保护性酶活性提高以及病程相关蛋白基因表达上调有关。
【作者单位】： 贵州大学生命科学学院/农业生物工程研究院山地植物资源保护与种质创新省部共建教育部重点实验室;贵州大学生命科学学院/农业生物工程研究院贵州省山地生态与农业生物工程2011协同创新中心;
【关键词】： 杜仲 几丁质酶基因 番茄 灰霉菌 抗病性
【基金】：国家“863”计划项目(2013AA102605-05) 国家自然科学基金项目(31360272) 国家转基因生物新品种培育科技重大专项(2016ZX08010003-009)~~
【分类号】：S436.412.13
【正文快照】： 收稿2016-02-25修定2016-04-14资助国家“863”计划项目(2013AA102605-05)、国家自然科学番茄灰霉病是造成番茄减产、品质下降的一种世界性重要病害(Morgan 1984),一般危害造成减产20%~30%,严重时可高达50%以上,对番茄生产构成极大威胁(纪军建等2012)。自20世纪80年代开始,番

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本文编号：930214