几种灵芝rDNA基因间隔序列分析与鉴定

发布时间：2017-09-30 12:17

  本文关键词：几种灵芝rDNA基因间隔序列分析与鉴定

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【摘要】：目的基于基因间隔序列(ITS)序列对灵芝进行分类。方法培养灵芝、提取DNA、优化聚合酶链反应(PCR)体系、纯化与克隆、测序、构建遗传进化树、进行遗传分析。结果经过一系列的梯度实验得知优化的PCR体系为25μl反应混合物中含模板DNA 25ng、Mg~(2+)为2.0 mmol/L、dNT Ps 200μmol/L、Taq 1.5 U、引物为20 pmol;最佳反应程序为93℃预变性4min,93℃变性40s,59℃退火40s,72℃延伸1 min,共35个循环,72℃继续延伸7min,4℃无限循环。所采用的HZ002、DZ003、NZ004和XC005在遗传进化树上面十分接近,说明其可以划分为同一菌属,同属于灵芝菌属。结论基于ITS序列对灵芝进行分类,与其他的分子标记技术所取得的分类结果一致,证实依据ITS序列来对真菌菌属进行分类是十分合理的。
【作者单位】： 湖南工业大学包装与材料工程学院;湖南中医药高等专科学校;
【关键词】： 灵芝 聚合酶链反应 基因间隔序列 遗传进化
【基金】：湖南省科技厅项目(No:2014sk3026)
【分类号】：S567.31
【正文快照】： 灵芝是一种名贵的药用真菌,在我国有悠久的药用历史[1]。《神农本草经》将其列为上品[2]。现代医学上也广泛研究和使用[3-6]。灵芝生长的适宜环境为:28~30℃温度、空气湿度70%~80%、二氧化碳CO2的比例0.1%、黑暗的外界生长条件[7]。以灵芝的形态学特征作为分类标准是灵芝科传，

本文编号：948152