过表达Brahma-相关基因1腺病毒载体对氧化应激诱导心肌细胞凋亡的影响

发布时间：2017-10-01 08:14

  本文关键词：过表达Brahma-相关基因1腺病毒载体对氧化应激诱导心肌细胞凋亡的影响

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【摘要】：背景:Brahma-相关基因1是调节染色质重构的重要核蛋白,在糖尿病心肌病中表达降低。目的:构建大鼠Brahma-相关基因1重组腺病毒载体,评价其在氧化应激诱导原代心肌细胞凋亡中的保护作用。方法:构建Brahma-相关基因1重组腺病毒载体质粒,经人胚肾293T细胞包装、扩增、计算滴度后,将Brahma-相关基因1重组腺病毒转染入SD乳鼠原代培养心肌细胞,以空载体EGFP转染细胞及正常细胞作为对照,24 h后,荧光显微镜观察转染效率;荧光定量PCR、免疫印迹法检测细胞Brahma-相关基因1mR NA、蛋白表达;24 h后,分别加入100μmol/L H2O2处理12 h,免疫印迹法检测Brahma-相关基因1蛋白表达、凋亡标志物cleaved-Caspase3表达,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果与结论:(1)构建的重组腺病毒成功转染至心肌细胞,转染效率达90%以上,被转染细胞的Brahma-相关基因1 mR NA、蛋白表达明显增高;(2)H2O2可显著抑制心肌细胞Brahma-相关基因1表达,诱导心肌细胞凋亡,刺激心肌细胞cleaved-Caspase3表达;Brahma-相关基因1重组腺病毒可减轻由H2O2导致的上述心肌细胞损伤;(3)结果表明,氧化应激能直接抑制心肌细胞Brahma-相关基因1表达,Brahma-相关基因1在氧化应激诱导的心肌细胞凋亡中发挥保护作用。
【作者单位】： 广州医科大学药学院药理学教研室;广州心血管疾病研究所;解放军兰州军区乌鲁木齐总医院检验科;
【关键词】： 基因 细胞 糖尿病心肌病 组织工程 实验动物 心血管及肺损伤与修复动物模型 Brahma-相关基因 腺病毒载体 氧化应激 心肌细胞 转染 基因治疗 国家自然科学基金
【基金】：国家自然科学基金项目(81402928) 广东省医学科研基金项目(B2012167) 广州市教育科研计划项目(2012C199)~~
【分类号】：R450
【正文快照】： 文章快速阅读: Brahma-相关基因1腺病毒载体抑制心肌细胞凋亡 将Brahma-相关基因124 h后,荧光显微镜观察转染效率;荧光结果表明,氧化应激能 获取SD乳鼠重组腺病毒转染入SD定量PCR、免疫印迹法检测细胞Brahma-直接抑制心肌细胞原代培养心乳鼠原代培养心肌细胞相关基因1mR NA

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1 葛晨;微小RNA-214对脓毒症小鼠心肌损伤的作用[D];河北医科大学;2015年

2 张洪明;X射线心脏局部照射致心肌细胞凋亡的分子机制[D];山西医科大学;2016年

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本文编号：952357