鲁氏耶尔森氏菌外膜蛋白ompF基因的分子克

发布时间：2017-10-03 23:24

  本文关键词：鲁氏耶尔森氏菌外膜蛋白ompF基因的分子克隆、生物信息学与免疫原性分析

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【摘要】：为筛选潜在的保护性抗原基因研制鲁氏耶尔森氏菌(Yersinia ruckeri)基因工程疫苗,实验利用特异性引物扩增分离自斑点叉尾銿(Ictalurus punctatus)的Y.ruckeri外膜蛋白omp F基因并对其进行分子克隆,应用相关软件和程序对其核苷酸及氨基酸序列进行生物信息学分析,并进行了omp F蛋白的表达和免疫原性检测。结果显示,omp F基因全长1 095 bp(Gen Bank登录号KP159420),包含一个编码364个氨基酸的完整开放阅读框,其氨基酸序列具有极高保守性,与Y.ruckeri外膜穿孔蛋白omp F(Gen Bank登录号ADK27779.1)亲缘关系最近,序列一致性为99.2%,进化树聚为一支;具有1个革兰氏阴性菌穿孔蛋白保守结构域,存在1个信号肽和1个跨膜区,是一种跨膜蛋白;具有12个与免疫相关的抗原决定簇区域。SDS-PAGE分析发现该蛋白主要以包涵体形式表达在沉淀,经Western-bolt显示omp F蛋白具有较好的免疫原性。以上结果表明omp F基因可作为Y.ruckeri基因工程疫苗的候选抗原基因。
【作者单位】： 四川农业大学动物医学院;四川农业大学动物疫病与人类健康四川省重点实验室;四川农业大学动物科技学院;
【关键词】： 鲁氏耶尔森氏菌 外膜蛋白 ompF基因 分子克隆 生物信息学 免疫原性
【基金】：教育部“长江学者和创新团队发展计划”创新团队项目(IRT0848) 四川省科技支撑计划项目(2014NZ0003)
【分类号】：S941.4
【正文快照】： 鲁氏耶尔森氏菌(Yersinia ruckeri),隶属肠杆菌科、耶尔森氏菌属,呈革兰氏阴性短杆状,是冷水性鲑科鱼类红嘴病(Enteric redmouth disease,ERM)的主要病原菌[1]。早在1952年美国首次发生虹鳟(Salmo garirdneri)红嘴病,1966年RUCKER等[2]从患病虹鳟体内首次分离得到该病原菌。自

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本文编号：967338