扁蓿豆SK2型脱水素基因MrDHN3的异源表达提高大肠杆菌对盐和高温胁迫的抗性

发布时间：2017-10-04 03:25

  本文关键词：扁蓿豆SK2型脱水素基因MrDHN3的异源表达提高大肠杆菌对盐和高温胁迫的抗性

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【摘要】：扁蓿豆为高原高寒地区优质豆科牧草,具有极强的抗旱、耐寒、抗盐碱的能力。脱水素(DHNs)是参与植物逆境应答的一类蛋白。根据前期RNA-seq的结果,从扁蓿豆幼苗中克隆到一个编码脱水素的基因MrDHN3。序列分析显示该基因含666bp的开放阅读框,编码221个氨基酸,为一个SK2型酸性脱水蛋白。氨基酸序列比对结果表明,MrDHN3与豆科植物白三叶和蒺藜苜蓿相似性最高,达83%。实时荧光定量PCR结果显示,MrDHN3基因受脱水、低温、高盐和脱落酸处理诱导表达,表明MrDHN3参与了扁蓿豆的非生物胁迫响应。通过构建原核表达载体,在大肠杆菌中过表达MrDHN3蛋白,检测重组菌在盐和高温胁迫处理下的生长存活情况。结果发现,在0.5mol/L NaCl和0.5mol/L KCl高盐胁迫条件下,重组大肠杆菌的存活率明显高于对照菌株;在55℃高温胁迫条件下,转化大肠杆菌的生长状态明显优于对照。表明MrDHN3对盐和高温引起的细胞损伤具有保护作用。为今后作物抗逆性遗传改良的研究提供了有用信息。
【作者单位】： 中国科学院西北高原生物研究所高原适应与进化重点实验室;中国科学院大学;
【关键词】： 脱水素基因 非生物胁迫 异源表达 扁蓿豆
【基金】：青海省应用基础研究计划(2014-ZJ-764) 中科院“西部之光”联合学者项目和中科院科技服务网络计划(KFJ-SW-STS-177)资助
【分类号】：S541.9
【正文快照】： 高盐、低温和干旱等环境胁迫是影响植物生长发育和产量的主要因素,植物作为固着的生物,在长期的进化过程中逐渐演化出了一系列应答机制[1]。其中,脱水蛋白作为一类重要的响应蛋白,在高盐、低温、干旱等脱水的环境胁迫信号刺激及外源ABA处理下积累表达[2]。脱水蛋白属于晚期胚

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本文编号：968377