家蚕let-7 microRNA靶基因Bmlin-41的克隆表达与调控

发布时间：2017-10-05 05:25

  本文关键词：家蚕let-7 microRNA靶基因Bmlin-41的克隆表达与调控

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【摘要】：异时性基因调控细胞增殖和个体发育阶段的转换。家蚕异时性基因在家蚕变态发育过程中也很可能具有重要的调控作用,但它们的表达模式、生物学功能以及与micro RNA之间的关系却鲜有报道。本研究首先利用果蝇同源基因lin-41搜索家蚕基因组数据库中相似序列,设计引物扩增Bmlin-41的编码序列,克隆了家蚕Bmlin-41基因CDS,其长度为2 166 bp,编码721个氨基酸,含有B-box和NHL结构域;随后,利用RT-PCR、q PCR技术并结合已有的家蚕全基因组芯片数据研究了Bmlin-41在家蚕中的时空表达模式,发现Bmlin-41在从家蚕胚胎到成虫的发育过程中呈逐渐递增的表达趋势,在五龄3 d不同组织中,于卵巢里表达量最高,精巢和中肠次之,而其余组织中低量表达或不表达;最后,利用3′RACE克隆了Bmlin-41基因的3′UTR,全长1 434 bp,用在线软件RNAhybrid预测发现Bmlin-41的3′UTR上存在bmo-let-7靶位点,构建了含Bmlin-41 3′UTR的双荧光素酶报告基因载体,在S2细胞上共转染Bmlin-41 3′UTR和bmo-let-7的模拟物(Mimics)和拮抗剂(Antagomir),bmo-let-7 mimics显著下调Bmlin-41,bmo-let-7 antagomir显著上调Bmlin-41,证实了Bmlin-41是bmo-let-7的靶基因。以上研究结果为深入研究let-7 mi RNA和Bmlin-41的功能,揭示Bmlin-41和bmo-let-7在家蚕变态发育过程中的调控关系提供了新的线索。
【作者单位】： 西南大学家蚕基因组生物学国家重点实验室;湖北文理学院医学院;
【关键词】： 家蚕 异时性基因 家蚕let- miRNA Bmlin- 表达模式 靶基因
【基金】：国家重点基础研究发展计划(973计划)(No.2012CB114602) 国家自然科学基金(Nos.31071136,31571334) 重庆市基础与前沿研究计划(No.cstc2014jcyjA00025)资助~~
【分类号】：Q78;S881.2
【正文快照】： Received:October 15,2015;Accepted:December 16,2015Supported by:National Basic Research Program of China(973 Program)(No.2012CB114602);National Natural Science Foundation ofChina(Nos.31071136,31571334),Fundamental and Advanced Research Projects of Chongqi

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 刘仕平;黄亚玺;尹纪云;吴小燕;周兰庭;王伟;夏庆友;;家蚕Bmyan基因的克隆表达和作为microRNA7靶基因的验证[J];生物工程学报;2015年11期

2 刘仕平;夏庆友;;Northern杂交检测家蚕microRNA的技术流程[J];蚕业科学;2014年04期

中国硕士学位论文全文数据库 前1条

1 周挺;家蚕let-7 miRNA的靶基因克隆和激素诱导[D];西南大学;2009年

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前5条

1 周兰庭;周挺;高君凌;王伟;吴小燕;黄亚玺;夏庆友;刘仕平;;家蚕let-7 microRNA靶基因Bmlin-41的克隆表达与调控[J];生物工程学报;2016年05期

2 何婷;尹权;王伟;黄亚玺;吴小燕;夏庆友;刘仕平;;利用Bac-to-Bac杆状病毒系统超量表达家蚕let-7簇microRNAs[J];中国农业科学;2016年03期

3 刘仕平;吴小燕;张丹宇;黄亚玺;王伟;赵萍;夏庆友;;家蚕microRNA 7靶基因Bmhairy的鉴定和转录表达模式[J];中国农业科学;2016年01期

4 熊黎;仝莉;王茂春;周宇荀;李凯;肖君华;;特异性逆转录microRNA-505的高效茎环引物的设计[J];现代生物医学进展;2015年27期

5 刘仕平;黄亚玺;尹纪云;吴小燕;周兰庭;王伟;夏庆友;;家蚕Bmyan基因的克隆表达和作为microRNA7靶基因的验证[J];生物工程学报;2015年11期

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 刘仕平;夏庆友;;Northern杂交检测家蚕microRNA的技术流程[J];蚕业科学;2014年04期

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 王虹;滕鸿琦;施珏平;张彦定;张明凤;;let-7 microRNA调控动物器官发育的研究进展[J];生命科学;2011年04期

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本文编号：975038