辣椒炭疽病的生防细菌筛选与活性测定

发布时间：2018-06-08 12:58

本文选题：生物防治 + 辣椒炭疽菌　；参考：《仲恺农业工程学院》2015年硕士论文

【摘要】：炭疽菌属(Colletotrichum Cda.)引起植物炭疽病,分布广泛、危害严重。辣椒炭疽菌(C.capsici)是该属的重要种之一,主要危害果实和叶片,对农林生产有严重影响。芽孢杆菌因能诱导植物产生抗病物质等特点,广泛应用于辣椒炭疽病的防治中。本文应用形态和分子特征对该菌进行鉴定,并开展了抑菌机理、产生活性物质的培养条件及抗菌物质的分离、纯化和鉴定等研究。实验结果如下:1.采用载片培养法从前期获得的22个菌株中快速筛选到4株(B7、B20、B22、B23)抑制辣椒炭疽菌孢子萌发和8株(B1、B2、B3、B4、B10、B11、B17、B18)抑制辣椒炭疽菌附着胞形成的生防菌株,通过形态特征、16Sr DNA序列分析进行鉴定,将B1、B2、B3、B4、B7、B10、B11、B17和B18菌株鉴定为枯草芽孢杆菌,B20、B22和B23菌株与枯草芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌都有极高的同源性,其分类地位有待进一步确定。2.采用平板对峙培养法对生防菌株进行抗菌谱测定,结果表明:抑制辣椒炭疽菌孢子萌发和抑制辣椒炭疽菌附着胞形成的生防菌株都能明显抑制辣椒炭疽菌、稻瘟病、拟茎点霉等重要病原菌的生长,抑菌率均达到50%以上。3.采用硫酸铵饱和度沉淀法分离抑制孢子萌发的生防菌株的发酵液中的活性蛋白组分,生测结果表明4个菌株的蛋白粗提液可100%抑制辣椒炭疽菌孢子萌发。进一步对粗提液用Sephadex G-75葡聚糖凝胶柱层析进行分离纯化,并通过载片培养法测定蛋白纯化物的生物活性。可以发现,B7菌株的第一个峰值处可完全抑制辣椒炭疽菌的孢子萌发。其余峰段的收集样品基本不影响孢子萌发和菌丝生长,但可抑制附着胞形成。采用20%-30%、30%-40%、40-70%硫酸铵饱和度分级沉淀法分离抑制附着胞形成的生防菌株发酵液中的活性蛋白组分,生物测定结果表明8个菌株的蛋白粗提液可100%抑制辣椒炭疽菌附着胞的形成。进一步对粗提液用Sephadex G-75葡聚糖凝胶柱层析进行分离纯化,并通过载片培养法测定蛋白纯化物的生物活性,可以发现,20%饱和度沉淀的蛋白粗提液对附着胞的抑制效果最佳。
[Abstract]:Anthracnose ( College of colletotrichum Cda . ) The results were as follows : 1 . Four strains ( B7 , 20 , B22 , B23 ) were isolated and purified from 22 strains . The results showed that the crude extract of the 8 strains could inhibit the formation of the attachment cells of the bacteria . The results showed that the crude extract of the 8 strains could inhibit the formation of the attachment cells .
【学位授予单位】：仲恺农业工程学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：S476.1;S436.418.11

【参考文献】