【摘要】:黄花蒿(Artemisia annua L.)作为传统药用植物,已经有两千多年的药用历史。具有多种次生代谢产物如萜类、多酚类、黄酮类等。由于黄花蒿受土壤微生物、光照、养分、水分、pH、酶活性等多种环境因素影响,因而影响次生代谢产物的积累。土壤微生物是土壤生态系统的重要成分,其生物过程在参与土壤生态系统养分循环和能量流动以及地上植物生长和地下微生物之间发挥重要的作用。为探究土壤微生物与药用次生代谢产物的关系,本文以黄花蒿为研究对象,通过贵阳市(GY)、罗甸县(LD)、三穗县(SS)、剑河县(JH)、黎平县(LP)和绥阳县(SY)18个样地54个样点黄花蒿主要次生代谢产物累积及土壤特征,探讨土壤微生物与黄花蒿次生代谢产物相关性。主要结果如下:1、黄花蒿土壤理化性质、酶活性不同样地黄花蒿土壤中有机质、氮、磷、钾含量及蔗糖酶、脲酶和磷酸酶活性差异较大,且该植物能在不同沙石含量的土壤中生长,说明黄花蒿的适应性广泛。样地的土壤有机质和全钾含量相对高,碱解氮含量较低,土壤酸碱度大多显中性;蔗糖酶活性较高,脲酶、磷酸酶活性较低。土壤酶活性与土壤的理化性质有关,蔗糖酶、脲酶和磷酸酶活性都与土壤全钾、湿度、碱解氮有极显著的相关性(P0.01),蔗糖酶和脲酶与有机质相关性显著(P0.05)。2、黄花蒿土壤微生物不同样地黄花蒿土壤均检测出24种磷脂脂肪酸(Phospholipid Fatty Acid,PLFAs),且微生物总量(总PLFAs含量)有较大差异,以细菌为主,从各类群微生物总的PLFAs含量来看,细菌真菌放线菌线虫,平均占土壤微生物总量的87.92%、5.73%、5.26%和0.55%。微生物总量及细菌总PLFAs含量在GY、SS、LP及SY相对较高,JH3、LD3含量较低。土壤微生物群落结构多样性指数最高为2.10(GY1),多样性指数最低为1.26(JH3);均匀度指数最高为0.66(GY1),最低为0.40(JH3);优势度指数最高为0.83(LD2),最低为0.55(JH3)。土壤微生物群落结构与环境因子有着密切的联系,基于24种PLFAs,通过典型对应分析及Mentel检测海拔、土壤pH、全磷、碱解氮(P=0.001)及全钾含量(P=0.009)与各微生物PLFAs偏相关关系达到极显著或显著水平。3、黄花蒿次生代谢产物含量不同样地青蒿素、青蒿酸、总多酚、东莨菪内酯、猫眼草酚、猫眼草黄素含量差异较大,含量高低依次是青蒿素、总多酚、东莨菪内酯、猫眼草黄素、青蒿酸、猫眼草酚。青蒿素含量在0.54~20.82 g/kg之间,总多酚含量在2.99~8.29 g/kg之间,东莨菪内酯含量在0.41~1.53g/kg之间,猫眼草黄素含量在0.20~0.56 g/kg之间,青蒿酸含量在0.02~0.47 g/kg之间,猫眼草酚含量在0.08~0.33 g/kg之间。4、黄花蒿土壤微生物及环境因子与次生代谢产物相关性土壤微生物与黄花蒿次生代谢产物有相关性。真菌、放线菌和线虫与青蒿素呈极显著正相关(P0.01);G~-与青蒿素、猫眼草酚呈极显著负相关(P0.01);微生物总量与青蒿素呈显著正相关(P0.05);放线菌与青蒿酸呈显著正相关(P0.05);放线菌、线虫与总多酚呈显著负相关(P0.05);微生物总量、细菌与东莨菪内酯呈显著负相关(P0.05);G~-、细菌与猫眼草黄素呈极显著负相关(P0.01)。除外,环境因子也对黄花蒿次生代谢产物含量有影响,土壤全氮、全磷、全钾与青蒿素呈极显著负相关(P0.01);全磷、pH与青蒿酸呈显著相关(P0.05);全氮、全钾与总多酚呈极显著正相关(P0.01);全磷、pH与东莨菪内酯、猫眼草黄素呈显著或极显著相关(P0.05或P0.01);pH与猫眼草酚呈极显著负相关(P0.01)。脲酶与猫眼草酚、猫眼草黄素呈显著或极显著正相关(P0.05或P0.01)。5、黄花蒿土壤3株无机磷细菌的解磷活性从黄花蒿土样中筛选出3株无机磷解磷细菌,命名为P1、P2、P3。生长速率大小依次为:P2㧐P1㧐P3;用无磷液体培养基培养5d,其解磷能力大小依次为P2㧐P1㧐P3;用有磷培养基培养20 h内生长速率(OD值)随时间增加而逐步增加,而pH则逐渐下降,有机酸也在随之产生变化;通过对菌株进行形态鉴定,对磷细菌的16S r RNA进行测序,通过BLAST检索同源序列及系统发育树构建。结合以上结果将其三株菌株鉴定为不动杆菌属(Acinetobacter sp.)。
【学位授予单位】:贵州师范大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2018
【分类号】:S154.3;S567.219
【图文】: 采样地点Figure2-1Samplingsites
土壤蔗糖酶活性Figure2-2Sucraseactivityinthesoil注:不同小写字母表示不同样地间蔗糖酶活性差异显著(P<0.05)
【参考文献】
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本文编号:
2713780
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