草莓重茬病原菌的分离及其拮抗菌的筛选与应用
发布时间：2021-07-02 12:34
为节省生产成本,利用大棚设施连年栽培草莓在一些地方很普遍,相应地也产生了较严重的草莓重茬病。本文通过对山东省临沂市典型草莓种植大棚进行取样分析,旨在明确草莓根腐病病原菌的种类及其生物学特性,为生物防控草莓根腐病提供科学依据。采用的研究方法是:以草莓根腐病病原菌为靶标病原菌,采用生物防治的方法进行拮抗菌的筛选,并对筛选的拮抗菌进行鉴定及生物学特性研究,将拮抗菌应用于盆栽试验和大田试验中,对拮抗菌的抗病促生效果进行了初步评价。先将主要研究结果如下:1)在发病草莓大棚采集大量发病植株,采用组织分离法获得菌株ZH-G01,纯化后通过形态学特征结合r DNA-ITS序列分析,对菌株ZH-G01进行鉴定,结果表明:菌株ZH-G01平皿菌落正面呈白色丝绒状,未产生色素,背面略微发黄,分生孢子4隔5个细胞,纺锤状,中心3个褐色异色胞,顶部具有3根或4根附属丝,尾部1根附属丝;菌株ZH-G01的ITS序列与Gen Bank中新棒状拟盘多毛孢Neopestalotiopsis clavispora的相似性达99%以上,结合形态学与分子生物学特征将病原菌鉴定为新棒状拟盘多毛孢,Gen Bank登录号为MN5...
【文章来源】：长江大学湖北省
【文章页数】：75 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
接菌植株与未接菌植株根系对比
结果分析224.1.3菌株ZH-G01的致病性草莓植株根部活体接病原菌7d后，叶片出现褐斑、卷曲，生长受阻；接菌15d后，叶片逐渐卷曲萎蔫，褐斑区域增加；接菌22d后，老叶基本枯萎，新叶未受影响；接菌30d后，地上部全部萎蔫，根部中柱部分表面发黑，切开内部中心呈褐色，2/3不定根发黑腐烂；对照组草莓植株健康无病症。将对照组与试验组草莓植株连根拔出，带回实验室采用组织分离法分离培养对照组和试验组的不定根和中柱部分，发现对照处理的根部组织中只有细菌和其它真菌，试验组平皿上菌落呈白色丝绒状，平皿形态与新棒状拟盘多毛孢Neopestalotiopsisclavispora极为相似，镜检其分生孢子，与新棒状拟盘多毛孢Neopestalotiopsisclavispora分生孢子的形态完全一致。通过柯赫氏法则证明菌株ZH-G01是引起草莓根腐病的病原菌。将对照处理中的健康植株和试验处理中的发病植株的叶片切开，置于显微镜（10×4）下观测，对照组叶肉组织完整，表现为绿色；试验组发病植株的叶肉组织受到破坏，表现为黄色或褐色，周围可观察到有病原菌的分生孢子（图4-4）。a：未接菌植株根系；b：接菌植株根系。a:Rootoftheuninoculatedplant;b:Rootoftheinoculatedplant.图4-3接菌植株与未接菌植株根系对比Fig.4-3Comparisonofrootsystembetweeninoculatedanduninoculatedplantsaba：未接菌植株叶片；b：接菌植株叶片。a:Leafoftheuninoculatedplant;b:Leafoftheinoculatedplant.图4-4接菌植株与未接菌植株叶片对比Fig.4-4Comparisonofleafbetweeninoculatedanduninoculatedplants
结果分析284.3拮抗菌的筛选及鉴定4.3.1拮抗菌的筛选结果经纯化的72株拮抗菌（编号0#-70#、Y1-7）与靶标病原菌Neopestalotiopsisclavispora进行重复多次的平皿对峙试验，最终筛选出拮抗效果好且拮抗效果稳定的3株菌，编号分别为17#、27#和Y1-7。平皿对峙效果如图4-7。由图4-8可以看出拮抗菌导致病原菌菌丝畸形，菌丝分支增多，菌丝弯曲、畸形，生长停滞。初步判定供试生防菌对目标病原菌有抑制作用。图4-7草莓根腐病病原菌与拮抗菌平皿对峙图Fig.4-7Antagonisticactivitiesbetweenco-cultureNeopestalotiopsisclavisporaandantagonisticstrains.图4-8病原菌丝形态镜检图Fig.4-8Microscopicexaminationofpathogenichypha
【参考文献】：
期刊论文
[1]复合促生菌对小麦苗期生长和土壤酶活的影响[J]. 王梦园,杜延全,朱建强. 中国农业科技导报. 2019(10)
[2]芽孢杆菌BS-6基于全基因组数据的分类鉴定及拮抗能力分析[J]. 戚家明,孙杉杉,张东旭,徐志文,徐延平. 生物技术通报. 2019(10)
[3]九种杀菌剂对新拟盘多毛孢病菌的室内毒力作用[J]. 温浩,魏佳爽,张桂军,毕扬,闫哲. 农药学学报. 2019(04)
[4]复合微生物菌剂对大棚草莓生长和品质的影响[J]. 周艳孔,倪秀红,王红彬. 安徽农学通报. 2019(10)
[5]贝莱斯芽孢杆菌3A3-15生防和促生机制[J]. 刘雪娇,李红亚,李术娜,朱宝成,高同国. 河北大学学报(自然科学版). 2019(03)
[6]蓝莓叶斑病病原菌鉴定及其生物学特性[J]. 薛德胜,李保华,练森,梁文星,王彩霞. 植物保护学报. 2019(02)
[7]防治蓝莓棒状拟盘多毛孢菌化学药剂的室内筛选[J]. 薛德胜,邵兆浩,李保华,王彩霞. 山东农业科学. 2018(09)
[8]落羽杉赤枯病病原菌的分离鉴定及生物学特性分析[J]. 张凡,冯婷,韩正敏,殷云龙,华建峰,於朝广. 植物保护学报. 2018(04)
[9]防治草莓炭疽病的芽胞杆菌组合的筛选[J]. 陈哲,黄静,赵佳,梁宏. 中国生物防治学报. 2018(04)
[10]一株辣椒内生拮抗细菌的筛选及初步鉴定[J]. 蔡长平,黄军,曾艳,毕世宇,黄彬彬,郭照辉,刘清术. 湖南农业科学. 2018(07)
博士论文
[1]解淀粉芽孢杆菌SQRT3防控番茄土传青枯病及其机理研究[D]. 李春雨.南京农业大学 2014
[2]抗甜瓜枯萎病生防菌及其生物有机肥的生防机理研究[D]. 赵青云.南京农业大学 2011
硕士论文
[1]榆阳区岔河则乡土地开发项目设计与管理研究[D]. 盛晓磊.西安理工大学 2017
[2]菜豆树叶斑病病原学及药剂敏感性研究[D]. 王玉.吉林农业大学 2017
[3]越西县古二乡土地整理规划及效益分析[D]. 刘硕.成都理工大学 2016
[4]葡萄有益内生芽孢杆菌的筛选及其作用机制研究[D]. 王艳霞.中国农业大学 2005
[5]对作物具有促生和防病作用的细菌组合的筛选[D]. 王素英.中国农业大学 2003
本文编号：3260474
【文章来源】：长江大学湖北省
【文章页数】：75 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
接菌植株与未接菌植株根系对比
结果分析224.1.3菌株ZH-G01的致病性草莓植株根部活体接病原菌7d后，叶片出现褐斑、卷曲，生长受阻；接菌15d后，叶片逐渐卷曲萎蔫，褐斑区域增加；接菌22d后，老叶基本枯萎，新叶未受影响；接菌30d后，地上部全部萎蔫，根部中柱部分表面发黑，切开内部中心呈褐色，2/3不定根发黑腐烂；对照组草莓植株健康无病症。将对照组与试验组草莓植株连根拔出，带回实验室采用组织分离法分离培养对照组和试验组的不定根和中柱部分，发现对照处理的根部组织中只有细菌和其它真菌，试验组平皿上菌落呈白色丝绒状，平皿形态与新棒状拟盘多毛孢Neopestalotiopsisclavispora极为相似，镜检其分生孢子，与新棒状拟盘多毛孢Neopestalotiopsisclavispora分生孢子的形态完全一致。通过柯赫氏法则证明菌株ZH-G01是引起草莓根腐病的病原菌。将对照处理中的健康植株和试验处理中的发病植株的叶片切开，置于显微镜（10×4）下观测，对照组叶肉组织完整，表现为绿色；试验组发病植株的叶肉组织受到破坏，表现为黄色或褐色，周围可观察到有病原菌的分生孢子（图4-4）。a：未接菌植株根系；b：接菌植株根系。a:Rootoftheuninoculatedplant;b:Rootoftheinoculatedplant.图4-3接菌植株与未接菌植株根系对比Fig.4-3Comparisonofrootsystembetweeninoculatedanduninoculatedplantsaba：未接菌植株叶片；b：接菌植株叶片。a:Leafoftheuninoculatedplant;b:Leafoftheinoculatedplant.图4-4接菌植株与未接菌植株叶片对比Fig.4-4Comparisonofleafbetweeninoculatedanduninoculatedplants
结果分析284.3拮抗菌的筛选及鉴定4.3.1拮抗菌的筛选结果经纯化的72株拮抗菌（编号0#-70#、Y1-7）与靶标病原菌Neopestalotiopsisclavispora进行重复多次的平皿对峙试验，最终筛选出拮抗效果好且拮抗效果稳定的3株菌，编号分别为17#、27#和Y1-7。平皿对峙效果如图4-7。由图4-8可以看出拮抗菌导致病原菌菌丝畸形，菌丝分支增多，菌丝弯曲、畸形，生长停滞。初步判定供试生防菌对目标病原菌有抑制作用。图4-7草莓根腐病病原菌与拮抗菌平皿对峙图Fig.4-7Antagonisticactivitiesbetweenco-cultureNeopestalotiopsisclavisporaandantagonisticstrains.图4-8病原菌丝形态镜检图Fig.4-8Microscopicexaminationofpathogenichypha
【参考文献】：
期刊论文
[1]复合促生菌对小麦苗期生长和土壤酶活的影响[J]. 王梦园,杜延全,朱建强. 中国农业科技导报. 2019(10)
[2]芽孢杆菌BS-6基于全基因组数据的分类鉴定及拮抗能力分析[J]. 戚家明,孙杉杉,张东旭,徐志文,徐延平. 生物技术通报. 2019(10)
[3]九种杀菌剂对新拟盘多毛孢病菌的室内毒力作用[J]. 温浩,魏佳爽,张桂军,毕扬,闫哲. 农药学学报. 2019(04)
[4]复合微生物菌剂对大棚草莓生长和品质的影响[J]. 周艳孔,倪秀红,王红彬. 安徽农学通报. 2019(10)
[5]贝莱斯芽孢杆菌3A3-15生防和促生机制[J]. 刘雪娇,李红亚,李术娜,朱宝成,高同国. 河北大学学报(自然科学版). 2019(03)
[6]蓝莓叶斑病病原菌鉴定及其生物学特性[J]. 薛德胜,李保华,练森,梁文星,王彩霞. 植物保护学报. 2019(02)
[7]防治蓝莓棒状拟盘多毛孢菌化学药剂的室内筛选[J]. 薛德胜,邵兆浩,李保华,王彩霞. 山东农业科学. 2018(09)
[8]落羽杉赤枯病病原菌的分离鉴定及生物学特性分析[J]. 张凡,冯婷,韩正敏,殷云龙,华建峰,於朝广. 植物保护学报. 2018(04)
[9]防治草莓炭疽病的芽胞杆菌组合的筛选[J]. 陈哲,黄静,赵佳,梁宏. 中国生物防治学报. 2018(04)
[10]一株辣椒内生拮抗细菌的筛选及初步鉴定[J]. 蔡长平,黄军,曾艳,毕世宇,黄彬彬,郭照辉,刘清术. 湖南农业科学. 2018(07)
博士论文
[1]解淀粉芽孢杆菌SQRT3防控番茄土传青枯病及其机理研究[D]. 李春雨.南京农业大学 2014
[2]抗甜瓜枯萎病生防菌及其生物有机肥的生防机理研究[D]. 赵青云.南京农业大学 2011
硕士论文
[1]榆阳区岔河则乡土地开发项目设计与管理研究[D]. 盛晓磊.西安理工大学 2017
[2]菜豆树叶斑病病原学及药剂敏感性研究[D]. 王玉.吉林农业大学 2017
[3]越西县古二乡土地整理规划及效益分析[D]. 刘硕.成都理工大学 2016
[4]葡萄有益内生芽孢杆菌的筛选及其作用机制研究[D]. 王艳霞.中国农业大学 2005
[5]对作物具有促生和防病作用的细菌组合的筛选[D]. 王素英.中国农业大学 2003
本文编号：3260474
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