飞虱类虫草共生菌分类地位及共生真菌多样性研究

发布时间：2021-07-11 00:33

　　长期以刺吸植株韧皮部汁液为食的飞虱,其体内均存在大量共牛菌。类酵母共生菌（Yeast-like symbiotes, YLS）是存在于飞虱体内的优势菌群,它们为寄主提供氨基酸、固醇类物质以及蛋白质等多种营养成分,保证飞虱的正常生长和繁殖。已有研究证明,飞虱体内存在多种YLS,其中有一种为类虫草共生菌,但其在真菌中分类地位还未完全确定。木研究运用多基因位点的分子系统发育分析方法,确定了飞虱类虫草共生菌的分类地位。同时,本研究利用对飞虱内生真菌nuc-SSU、nuc-LSU和EF-1α基因克隆和序列比对分析的方法,首次对烟翅白背飞虱Sogatella Kolophon、长绿飞虱Saccharosydne procerus和黑边梅塔飞虱Metadelphax propinqua体内共生真菌的多样性进行了研究。现将主要结果陈述如下：1.通过形态特征的观察,将采集来的宿主飞虱鉴定为7属11种,它们分别是：褐飞虱属的褐飞虱、拟褐飞虱、伪褐飞虱；白背飞虱属的白背飞虱、稗飞虱、烟翅白背飞虱；灰飞虱属的灰飞虱;梅塔飞虱属的黑边梅塔飞虱；长飞虱属的长绿飞虱；白条飞虱属的白条飞虱以及纹翅飞虱属的黑斑纹翅飞虱... 

【文章来源】：安徽农业大学安徽省

【文章页数】：57 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
1 文献综述
    1.1 飞虱的概述
        1.1.1 飞虱的分类地位
        1.1.2 飞虱的形态特征
        1.1.3 飞虱的生活习性
        1.1.4 飞虱的危害
    1.2 昆虫内共生菌的研究进展
        1.2.1 昆虫内共生菌概述
        1.2.2 昆虫与内共生菌的相互关系
        1.2.3 昆虫共生菌的研究方法
        1.2.4 飞虱体内共生菌的研究进展
    1.3 分子生物学在真菌鉴定与分类中的应用
        1.3.1 核酸序列分析
        1.3.2 核酸序列分析在真菌中的应用
        1.3.3 多核酸序列分析在真菌中的应用
    1.4 研究目的与意义
2 引言
3 材料与方法
    3.1 材料
        3.1.1 供试虫源
        3.1.2 LB培养基的配制
        3.1.3 主要化学试剂
        3.1.4 主要试剂配制
        3.1.5 主要仪器设备
    3.2 方法
        3.2.1 宿主飞虱的鉴别
        3.2.2 共生菌的获取
        3.2.3 类酵母共生菌的形态学观察
        3.2.4 DNA的提取与纯化
        3.2.5 DNA浓度和质量检测
        3.2.6 PCR扩增反应引物、体系和程序
        3.2.7 PCR扩增产物的测序
        3.2.8 序列数据分析与系统发育树的构建
4 结果与分析
    4.1 宿主飞虱的鉴定
    4.2 总DNA的质量检测
    4.3 nuc-SSU部分区段扩增和克隆结果
    4.4 nuc-LSU部分区段扩增和克隆结果
    4.5 EF-1α部分区段扩增和克隆结果
    4.6 RPB1部分区段扩增和克隆结果
    4.7 RPB2部分区段扩增和克隆结果
    4.8 飞虱类虫草共生菌的系统发育分析
        4.8.1 基于五个基因位点序列对类虫草共生菌分类地位的确定
        4.8.2 基于SSU rDNA序列对9株飞虱类虫草共生菌分子鉴定
        4.8.3 基于EF-1α序列对黑斑纹翅飞虱类虫草共生菌的系统发育分析
    4.9 飞虱共生真菌的多样性分析
        4.9.1 烟翅白背飞虱共生真菌多样性研究
        4.9.2 长绿飞虱共生真菌多样性研究
        4.9.3 黑边梅塔飞虱共生真菌多样性研究
5 讨论
6 结论
参考文献
致谢
作者简介
攻读硕士学位期间发表的学术论文



本文编号：3276965