阿特拉津和毒死蜱单一及联合暴露对鲤鱼免疫器官自噬的影响
发布时间：2022-01-05 01:04
除草剂和杀虫剂的使用不当对生态环境产生了一定程度的污染,并且一直以来都以混合应用的方式应用于农业生产中,这使对农药对生态环境以及生物安全的评价更加复杂。阿特拉津（Atrazine）是三氮苯类农药,是常用的除草剂,而毒死蜱（Chlorpyrifos）是有机磷类农药,是常用的杀虫剂,这两种都是农业生产中广泛应用的农药,大量的农药通过地表径流、淋溶、干/湿沉降等方式进入水体后不但对大型水生植物和浮游藻类产生毒害作用,同时也会对包括鱼类在内的大量水生动物也有一定的毒理效应。这两种农药的大量使用对动物表现出一定的毒性作用,因为其残留期长并且在水体环境中检出率高,所以近年来受到了广泛的关注。本文以鲤鱼为供试动物,研究阿特拉津（4.28、42.8和428μg/L）、毒死蜱（1.16、11.6和116μg/L）以及二者联合（1.13、11.3和113μg/L）亚慢性暴露对鲤鱼头肾和脾脏组织细胞因子基因（IL-6、IL-8、IL-10、TNF-a和TGF-β）表达和组织自噬相关基因（LC3、dynein和TOR）表达、头肾和脾脏的形态学结构及抗氧化酶（ASA, AHR、POD）、氧化氮（NO）和诱导型一...
【文章来源】：东北农业大学黑龙江省 211工程院校
【文章页数】：63 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
1 引言
1.1 细胞因子在毒理学中的应用
1.2 鲤鱼头肾和脾脏的形态学研究
1.3 自噬与毒理学的研究
1.4 抗氧化在免疫毒理学的作用
1.5 目的与意义
2 材料与方法
2.1 试验鱼的驯养及暴露环境
2.2 试验的总体设计
2.2.1 暴露试验
2.2.2 恢复试验
2.3 样品的采集与处理
2.4 主要仪器和试剂
2.4.1 试验毒物
2.4.2 主要仪器
2.4.3 主要试剂
2.5 检测项目与方法
2.5.1 组织抗氧化指标的检测
2.5.2 组织超微结构的观察
2.6 鲤鱼头肾和脾脏中自噬和细胞因子相关基因mRNA表达的检测
2.6.1 引物的设计与合成
2.6.2 总RNA的提取
2.6.3 反转录反应
2.6.4 实时定量PCR扩增
2.6.5 PfaffL法分析基因表达的相对差异
2.7 试验数据的分析与统计
3 结果与分析
3.1 组织自噬体观察结果
3.2 鲤鱼头肾和脾脏自噬和细胞因子mRNA表达的检测结果
3.2.1 实时PCR检测方法的建立
3.2.2 鲤鱼头肾和脾脏自噬、细胞因子和β-actine real-time PCR扩增结果
3.2.3 ATR和CFP亚慢性暴露对鲤鱼头肾和脾脏LC3 mRNA表达影响检测结果
3.2.4 ATR和CFP亚慢性暴露对鲤鱼头肾和脾脏dynein mRNA表达影响检测结果
3.2.5 ATR和CFP亚慢性暴露对鲤鱼头肾和脾脏TOR mRNA表达影响检测结果
3.2.6 ATR和CFP亚慢性暴露对鲤鱼头肾和脾脏IL-6 mRNA表达影响检测结果
3.2.7 ATR和CFP亚慢性暴露对鲤鱼头肾和脾脏IL-8 mRNA表达影响检测结果
3.2.8 ATR和CFP亚慢性暴露对鲤鱼头肾和脾脏TNF-α mRNA表达影响检测结果
3.2.9 ATR和CFP亚慢性暴露对鲤鱼头肾和脾脏IL-10 mRNA表达影响检测结果
3.2.10 ATR和CFP亚慢性暴露对鲤鱼头肾和脾脏TGF-β mRNA表达影响结果
3.3 鲤鱼头肾和脾脏组织抗氧化功能的检测结果
3.3.1 头肾和脾脏中抗超氧阴离子活力的检测结果
3.3.2 鲤鱼头肾和脾脏中抗羟自由基活力的检测结果
3.3.3 鲤鱼头肾和脾脏中过氧化物酶活力的检测结果
3.3.4 鲤鱼头肾和脾脏中诱导型一氧化氮合酶活性的检测结果
3.3.5 鲤鱼头肾和脾脏中一氧化氮水平的检测结果
4 讨论
4.1 ATR和CFP单一及联合亚慢性暴露后对鲤鱼头肾和脾脏细胞因子的影响
4.1.1 ATR和CFP亚慢性暴露对鲤鱼头肾和脾脏IL-6、IL-8和TNF-αmRNA表达影响
4.1.2 ATR和CFP亚慢性暴露对鲤鱼头肾和脾脏IL-10和TGF-p mRNA表达的影响
4.2 ATR和CFP单一及联合亚慢性暴露后对鲤鱼头肾和脾脏自噬体和相关基因影响
4.3 ATR和CFP单一及联合亚慢性暴露对鲤鱼头肾和脾脏抗氧化功能的影响
4.3.1 ATR和CFP单一及联合亚慢性暴露后对鲤鱼头肾和脾脏组中抗超氧阴离子,抗羟自由基和过氧化物酶活力的影响
4.3.2 ATR和CFP单一及联合亚慢性暴露后对鲤鱼头肾和脾脏组中对NO含量和iNOS活性的影响
4.4 ATR和CFP单一及联合亚慢性暴露对鲤鱼头肾和脾脏自噬和抗氧化功能的影响
5 结论
致谢
参考文献
附录
攻读硕士学位期间发表的学术论文
本文编号：3569415
【文章来源】：东北农业大学黑龙江省 211工程院校
【文章页数】：63 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
1 引言
1.1 细胞因子在毒理学中的应用
1.2 鲤鱼头肾和脾脏的形态学研究
1.3 自噬与毒理学的研究
1.4 抗氧化在免疫毒理学的作用
1.5 目的与意义
2 材料与方法
2.1 试验鱼的驯养及暴露环境
2.2 试验的总体设计
2.2.1 暴露试验
2.2.2 恢复试验
2.3 样品的采集与处理
2.4 主要仪器和试剂
2.4.1 试验毒物
2.4.2 主要仪器
2.4.3 主要试剂
2.5 检测项目与方法
2.5.1 组织抗氧化指标的检测
2.5.2 组织超微结构的观察
2.6 鲤鱼头肾和脾脏中自噬和细胞因子相关基因mRNA表达的检测
2.6.1 引物的设计与合成
2.6.2 总RNA的提取
2.6.3 反转录反应
2.6.4 实时定量PCR扩增
2.6.5 PfaffL法分析基因表达的相对差异
2.7 试验数据的分析与统计
3 结果与分析
3.1 组织自噬体观察结果
3.2 鲤鱼头肾和脾脏自噬和细胞因子mRNA表达的检测结果
3.2.1 实时PCR检测方法的建立
3.2.2 鲤鱼头肾和脾脏自噬、细胞因子和β-actine real-time PCR扩增结果
3.2.3 ATR和CFP亚慢性暴露对鲤鱼头肾和脾脏LC3 mRNA表达影响检测结果
3.2.4 ATR和CFP亚慢性暴露对鲤鱼头肾和脾脏dynein mRNA表达影响检测结果
3.2.5 ATR和CFP亚慢性暴露对鲤鱼头肾和脾脏TOR mRNA表达影响检测结果
3.2.6 ATR和CFP亚慢性暴露对鲤鱼头肾和脾脏IL-6 mRNA表达影响检测结果
3.2.7 ATR和CFP亚慢性暴露对鲤鱼头肾和脾脏IL-8 mRNA表达影响检测结果
3.2.8 ATR和CFP亚慢性暴露对鲤鱼头肾和脾脏TNF-α mRNA表达影响检测结果
3.2.9 ATR和CFP亚慢性暴露对鲤鱼头肾和脾脏IL-10 mRNA表达影响检测结果
3.2.10 ATR和CFP亚慢性暴露对鲤鱼头肾和脾脏TGF-β mRNA表达影响结果
3.3 鲤鱼头肾和脾脏组织抗氧化功能的检测结果
3.3.1 头肾和脾脏中抗超氧阴离子活力的检测结果
3.3.2 鲤鱼头肾和脾脏中抗羟自由基活力的检测结果
3.3.3 鲤鱼头肾和脾脏中过氧化物酶活力的检测结果
3.3.4 鲤鱼头肾和脾脏中诱导型一氧化氮合酶活性的检测结果
3.3.5 鲤鱼头肾和脾脏中一氧化氮水平的检测结果
4 讨论
4.1 ATR和CFP单一及联合亚慢性暴露后对鲤鱼头肾和脾脏细胞因子的影响
4.1.1 ATR和CFP亚慢性暴露对鲤鱼头肾和脾脏IL-6、IL-8和TNF-αmRNA表达影响
4.1.2 ATR和CFP亚慢性暴露对鲤鱼头肾和脾脏IL-10和TGF-p mRNA表达的影响
4.2 ATR和CFP单一及联合亚慢性暴露后对鲤鱼头肾和脾脏自噬体和相关基因影响
4.3 ATR和CFP单一及联合亚慢性暴露对鲤鱼头肾和脾脏抗氧化功能的影响
4.3.1 ATR和CFP单一及联合亚慢性暴露后对鲤鱼头肾和脾脏组中抗超氧阴离子,抗羟自由基和过氧化物酶活力的影响
4.3.2 ATR和CFP单一及联合亚慢性暴露后对鲤鱼头肾和脾脏组中对NO含量和iNOS活性的影响
4.4 ATR和CFP单一及联合亚慢性暴露对鲤鱼头肾和脾脏自噬和抗氧化功能的影响
5 结论
致谢
参考文献
附录
攻读硕士学位期间发表的学术论文
本文编号：3569415
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