洛阳地区烟株根围拮抗放线菌筛选与土壤放线菌多样性分析
发布时间：2022-08-12 14:38
烟草是我国重要的经济作物,由烟草疫霉侵染烟草引起的黑胫病是一种分布广泛、危害严重的毁灭性土传病害。目前该病害的防治措施主要有种植抗病品种、化学防治、农业防治和生物防治等,其中拮抗放线菌在烟草病害生物防治上的应用是研究热点之一。为了明确洛阳烟区烟株根围土壤中拮抗放线菌的种类,探究土壤放线菌的多样性及群落结构,试验采用改良平板对峙法与菌丝生长速率法测定了筛选菌株及其发酵液对烟草疫霉的拮抗作用;通过形态学观察、生理生化测定及16S rDNA序列分析鉴定了优势拮抗放线菌的种类;采用Illumina MiSeq测序技术探究了烟株根围土壤中放线菌的多样性及群落结构。主要研究结果如下。（1）从烟株根围土壤分离的放线菌稀释涂布平板上共挑出放线菌单菌落496个,进一步分离纯化获得形态或颜色不同的放线菌单菌落227个。（2）15株拮抗放线菌的发酵液对烟草疫霉具有较强的拮抗作用,其中8个菌株的发酵液对烟草疫霉菌丝生长的抑制率达100%。（3）从18株拮抗放线菌中鉴定得到12个种,分别为温和链霉菌（Streptomyces moderatus）、教酒色链霉菌（S.chartreusis）、玫瑰黄链霉菌（S.r...
【文章页数】：72 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
abstract
第1章 文献综述
1.1 放线菌的研究概述
1.1.1 放线菌的分类地位
1.1.2 放线菌的分类鉴定方法
1.1.3 放线菌在植物病害防治上的应用
1.1.4 放线菌在烟草病害防治上的应用
1.1.5 放线菌的生物防治机制
1.2 土壤微生物多样性的研究概述
1.2.1 土壤微生物多样性的含义
1.2.2 土壤微生物多样性的研究方法
1.2.3 Illumina MiSeq测序技术在土壤微生物多样性研究中的应用
1.3 本研究的目的及意义
第2章 烟株根围土壤中抗烟草疫霉放线菌的筛选
2.1 材料与方法
2.1.1 试验材料
2.1.2 培养基
2.1.3 根围放线菌的纯化
2.1.4 拮抗放线菌的初筛
2.1.5 拮抗放线菌的复筛
2.2 结果与分析
2.2.1 根围放线菌的纯化
2.2.2 拮抗放线菌的初筛
2.2.3 拮抗放线菌的复筛
2.3 小结与讨论
2.3.1 小结
2.3.2 讨论
第3章 拮抗放线菌的形态及生理生化特征
3.1 材料与方法
3.1.1 试验材料
3.1.2 培养基
3.1.3 形态及培养特征观察
3.1.4 生理生化特征观察
3.2 结果与分析
3.2.1 形态及培养特征
3.2.2 生理生化特征
3.3 小结与讨论
3.3.1 小结
3.3.2 讨论
第4章 拮抗放线菌的分子鉴定
4.1 试验与材料
4.1.1 试验材料
4.1.2 主要仪器
4.1.3 主要试剂
4.1.4 放线菌DNA提取方法
4.1.5 放线菌16S rDNA的扩增
4.1.6 放线菌系统发育树的构建
4.2 结果与分析
4.2.1 待续菌株的比对
4.2.2 待测菌株的系统发育树
4.3 小结与讨论
4.3.1 小结
4.3.2 讨论
第5章 烟株根围土壤放线菌的多样性及群落结构分析
5.1 材料与方法
5.1.1 试验材料
5.1.2 田间试验设计
5.1.3 样品采集
5.1.4 烟株根围土壤中放线菌的检测
5.2 结果与分析
5.2.1 样品测序结果及取样深度验证
5.2.2 样品稀释度曲线分析
5.2.3 Alpha多样性指数分析
5.2.4 OTU Rank曲线分析
5.2.5 韦恩图分析
5.2.6 物种丰度分析
5.3 小结与讨论
5.3.1 小结
5.3.2 讨论
第6章 结论
参考文献
缩略语词汇表
附录 Ⅰ 拮抗放线菌对烟草疫霉的拮抗效果
附录 Ⅱ 拮抗放线菌的鉴定
致谢
攻读学位期间的研究成果
【参考文献】：
期刊论文
[1]山西临汾小麦—玉米轮作田土壤微生物多样性分析[J]. 张红娟,陈丽,赵芳,王睿,谢咸升. 中国植保导刊. 2018(11)
[2]不同施肥处理对高粱根际土壤微生物功能多样性的影响[J]. 崔佩佩,武爱莲,王劲松,董二伟,南江宽,白文斌,焦晓燕. 华北农学报. 2018(05)
[3]生防放线菌CY-14的鉴定及其发酵液对香蕉炭疽病的防治效果[J]. 张月凤,辜柳霜,柳志强,李晓宇. 农药学学报. 2018(05)
[4]番茄灰霉菌拮抗放线菌LA-5的筛选及鉴定[J]. 李培谦,冯宝珍,李新秀,郝浩永. 应用生态学报. 2018(12)
[5]高通量测序技术在微生物分子生态学研究中的应用[J]. 王新珍,王凤花,孙瑞波,刘彬彬. 中国生态农业学报. 2018(10)
[6]基因组测序技术及其应用研究进展[J]. 李国治,邓卫东. 安徽农业科学. 2018(22)
[7]有机肥施用对烟田土壤细菌多态性的影响[J]. 杨德廉,李祥英,马夙静,赵文超,王大海,管恩森,张英华,孟庆宏,刘振宇. 中国烟草科学. 2018(03)
[8]海洋弗氏链霉菌HNM0089抗真菌活性成分研究[J]. 陶琳,丛子文,周双清,黄东益,吴文嫱,许云,夏薇,张荣萍,黄小龙. 热带作物学报. 2018(04)
[9]烟草不同部位内生细菌的多样性[J]. 林丽,陈泽斌,何群香,徐松萍,华金珠,黄丽,徐胜光. 江苏农业科学. 2017(22)
[10]未培养微生物分离培养技术研究进展[J]. 邢磊,赵圣国,郑楠,李松励,王加启. 微生物学通报. 2017(12)
博士论文
[1]链霉菌3-10抗真菌代谢产物鉴定及防病潜力评估[D]. 吕昂.华中农业大学 2017
[2]呼伦贝尔主要草地类型植被特征、土壤特性与微生物多样性研究[D]. 文都日乐.内蒙古农业大学 2011
硕士论文
[1]拮抗放线菌FX-H-2的鉴定、发酵条件优化及生防效果评价[D]. 郭春燕.山东农业大学 2018
[2]新疆泥火山不同生境土壤细菌群落结构多样性的研究[D]. 杨娟.石河子大学 2016
[3]极长链霉菌（Streptomyces longissimus）SL01代谢产物及斑蝥素衍生物抑菌活性的研究[D]. 查顺清.西北农林科技大学 2016
[4]烟草黑胫菌拮抗放线菌的筛选、鉴定及其生防效果研究[D]. 张茹萍.山东农业大学 2011
[5]烟草黑胫病菌、青枯病菌拮抗放线菌的筛选及控病研究[D]. 王岩.西南大学 2009
[6]西藏地区土壤放线菌种群多样性及戈登氏菌的多相分类研究[D]. 罗红丽.西南大学 2006
本文编号：3676059
【文章页数】：72 页
【学位级别】：硕士
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摘要
abstract
第1章 文献综述
1.1 放线菌的研究概述
1.1.1 放线菌的分类地位
1.1.2 放线菌的分类鉴定方法
1.1.3 放线菌在植物病害防治上的应用
1.1.4 放线菌在烟草病害防治上的应用
1.1.5 放线菌的生物防治机制
1.2 土壤微生物多样性的研究概述
1.2.1 土壤微生物多样性的含义
1.2.2 土壤微生物多样性的研究方法
1.2.3 Illumina MiSeq测序技术在土壤微生物多样性研究中的应用
1.3 本研究的目的及意义
第2章 烟株根围土壤中抗烟草疫霉放线菌的筛选
2.1 材料与方法
2.1.1 试验材料
2.1.2 培养基
2.1.3 根围放线菌的纯化
2.1.4 拮抗放线菌的初筛
2.1.5 拮抗放线菌的复筛
2.2 结果与分析
2.2.1 根围放线菌的纯化
2.2.2 拮抗放线菌的初筛
2.2.3 拮抗放线菌的复筛
2.3 小结与讨论
2.3.1 小结
2.3.2 讨论
第3章 拮抗放线菌的形态及生理生化特征
3.1 材料与方法
3.1.1 试验材料
3.1.2 培养基
3.1.3 形态及培养特征观察
3.1.4 生理生化特征观察
3.2 结果与分析
3.2.1 形态及培养特征
3.2.2 生理生化特征
3.3 小结与讨论
3.3.1 小结
3.3.2 讨论
第4章 拮抗放线菌的分子鉴定
4.1 试验与材料
4.1.1 试验材料
4.1.2 主要仪器
4.1.3 主要试剂
4.1.4 放线菌DNA提取方法
4.1.5 放线菌16S rDNA的扩增
4.1.6 放线菌系统发育树的构建
4.2 结果与分析
4.2.1 待续菌株的比对
4.2.2 待测菌株的系统发育树
4.3 小结与讨论
4.3.1 小结
4.3.2 讨论
第5章 烟株根围土壤放线菌的多样性及群落结构分析
5.1 材料与方法
5.1.1 试验材料
5.1.2 田间试验设计
5.1.3 样品采集
5.1.4 烟株根围土壤中放线菌的检测
5.2 结果与分析
5.2.1 样品测序结果及取样深度验证
5.2.2 样品稀释度曲线分析
5.2.3 Alpha多样性指数分析
5.2.4 OTU Rank曲线分析
5.2.5 韦恩图分析
5.2.6 物种丰度分析
5.3 小结与讨论
5.3.1 小结
5.3.2 讨论
第6章 结论
参考文献
缩略语词汇表
附录 Ⅰ 拮抗放线菌对烟草疫霉的拮抗效果
附录 Ⅱ 拮抗放线菌的鉴定
致谢
攻读学位期间的研究成果
【参考文献】：
期刊论文
[1]山西临汾小麦—玉米轮作田土壤微生物多样性分析[J]. 张红娟,陈丽,赵芳,王睿,谢咸升. 中国植保导刊. 2018(11)
[2]不同施肥处理对高粱根际土壤微生物功能多样性的影响[J]. 崔佩佩,武爱莲,王劲松,董二伟,南江宽,白文斌,焦晓燕. 华北农学报. 2018(05)
[3]生防放线菌CY-14的鉴定及其发酵液对香蕉炭疽病的防治效果[J]. 张月凤,辜柳霜,柳志强,李晓宇. 农药学学报. 2018(05)
[4]番茄灰霉菌拮抗放线菌LA-5的筛选及鉴定[J]. 李培谦,冯宝珍,李新秀,郝浩永. 应用生态学报. 2018(12)
[5]高通量测序技术在微生物分子生态学研究中的应用[J]. 王新珍,王凤花,孙瑞波,刘彬彬. 中国生态农业学报. 2018(10)
[6]基因组测序技术及其应用研究进展[J]. 李国治,邓卫东. 安徽农业科学. 2018(22)
[7]有机肥施用对烟田土壤细菌多态性的影响[J]. 杨德廉,李祥英,马夙静,赵文超,王大海,管恩森,张英华,孟庆宏,刘振宇. 中国烟草科学. 2018(03)
[8]海洋弗氏链霉菌HNM0089抗真菌活性成分研究[J]. 陶琳,丛子文,周双清,黄东益,吴文嫱,许云,夏薇,张荣萍,黄小龙. 热带作物学报. 2018(04)
[9]烟草不同部位内生细菌的多样性[J]. 林丽,陈泽斌,何群香,徐松萍,华金珠,黄丽,徐胜光. 江苏农业科学. 2017(22)
[10]未培养微生物分离培养技术研究进展[J]. 邢磊,赵圣国,郑楠,李松励,王加启. 微生物学通报. 2017(12)
博士论文
[1]链霉菌3-10抗真菌代谢产物鉴定及防病潜力评估[D]. 吕昂.华中农业大学 2017
[2]呼伦贝尔主要草地类型植被特征、土壤特性与微生物多样性研究[D]. 文都日乐.内蒙古农业大学 2011
硕士论文
[1]拮抗放线菌FX-H-2的鉴定、发酵条件优化及生防效果评价[D]. 郭春燕.山东农业大学 2018
[2]新疆泥火山不同生境土壤细菌群落结构多样性的研究[D]. 杨娟.石河子大学 2016
[3]极长链霉菌（Streptomyces longissimus）SL01代谢产物及斑蝥素衍生物抑菌活性的研究[D]. 查顺清.西北农林科技大学 2016
[4]烟草黑胫菌拮抗放线菌的筛选、鉴定及其生防效果研究[D]. 张茹萍.山东农业大学 2011
[5]烟草黑胫病菌、青枯病菌拮抗放线菌的筛选及控病研究[D]. 王岩.西南大学 2009
[6]西藏地区土壤放线菌种群多样性及戈登氏菌的多相分类研究[D]. 罗红丽.西南大学 2006
本文编号：3676059
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