AIV（GD1/96）M基因克隆表达与AI防制药物的研究

发布时间：2021-11-02 06:38

　　本文对禽流感GD/1/96株的M2基因进行了克隆与序列测定，并在昆虫细胞（sf9）中表达了M基因，同时研制了一种经济有效的抗禽流感新药，旨在为我国禽流感的新型疫苗的研制、快速诊断以及化学防制奠定基础。具体内容如下： 1．取感染GD1/9620小时的未死SPF鸡胚的尿囊膜、肌肉等组织研磨、匀浆，提取总RNA。利用反转录—聚合酶链反应（RT-PCR）技术，扩增出编码M2蛋白的cDNA，以pMD18-T为载体克隆转化到感受态的大肠杆菌中，经酶切和PCR分析鉴定后，测定全基因的核苷酸序列。测序结果表明克隆到M2基因的cDNA全长为311bp，包括整个阅读框297bp，编码97个氨基酸残基。由于M2蛋白可作为新一代的流感疫苗，因而M2基因的成功克隆可为M2蛋白的大量表达和新型疫苗的研制奠定基础。 2．从pUCM1质粒中亚克隆M基因至转移载体pFastBacl质粒，PCR鉴定后，转化DH10_BAC感受态细胞。提取重组bacmid杆粒rBacM，以M13为引物作PCR分析，证明M基因已转入其中。用CellFECTIN试剂包裹rBacM杆粒转染sf9细胞，96h收取感... 

【文章来源】：南京农业大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：50 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
全文摘要
文献综述： 禽流感的研究进展
    病原学
    流行病学及生态学
    病理学变化
    免疫
    诊断
    防制
    禽流感在哺乳动物（包括人）流感中的作用
试验一： 禽流感病毒GD/1/96（H5N1）株M2基因的克隆与序列测定
    中文摘要
    正文
    英文摘要
试验二： 禽流感病毒GD/1/96（H5N1）M基因在sf9昆虫细胞中的表达
    中文摘要
    正文
    英文摘要
试验三： 抗禽流感新药‘呼毒灵’的研制
    中文摘要
    正文
    英文摘要
全文结论
参考文献
全文英文摘要
附录： 试验用仪器药品
致谢



本文编号：3471529