下调垂体肿瘤转化基因1表达对前列腺癌LNCaP-AI细胞衰老的影响

发布时间：2024-03-31 08:10

　　目的:探讨下调垂体肿瘤转化基因1(PTTG1)的表达对人去势抵抗前列腺癌LNCaP-AI细胞衰老的影响。方法:采用体外诱导的人去势抵抗前列腺癌LNCaP-AI细胞模型, LNCaP-AI细胞转染靶向PTTG1基因的siRNA为siRNA-PTTG1组,只添加转染试剂为Mock组,转染阴性序列为NC组。于含雄激素培养液(FBS)/去除雄激素培养液(CSS)中培养各组细胞,细胞计数实验比较各组细胞数量变化。采用细胞衰老-β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色试剂盒检测衰老细胞数目;Western印迹检测β-半乳糖苷酶蛋白1(Glb1)、细胞周期相关蛋白(p-21^CIP1、p-27^Kip1)、异染色质蛋白1γ(HP1γ)的表达情况。结果:siRNA有效抑制了LNCaP-AI细胞中PTTG1的表达。siRNA-PTTG1组在FBS中培养,细胞数量增加,而在CSS中培养,细胞数量呈减少趋势;Mock组及NC组在上述不同培养液中细胞数量均呈增长趋势,siRNA-PTTG1组与Mock组和NC组比较差异有统计学意义(P<0.05)。SA-β-Gal染...

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
    1.2 主要试剂
    1.3 主要仪器
    1.4 方法
        1.4.1 siRNA表达序列的确定
        1.4.2 细胞培养及siRNA转染
        1.4.3 Mock组、NC组、siRNA-PTTG1组LNCaP-AI细胞在含/去雄激素培养液中的生长情况比较
        1.4.4 转染后细胞衰老情况检测
        1.4.5 Western 印迹检测相关蛋白表达
    1.5 统计学分析
2 结果
    2.1 Western印迹检测转染效率
    2.2 转染后LNCaP-AI细胞在FBS、CSS培养液中的生长状况
    2.3 SA-β-Gal染色检测转染后衰老细胞数变化
    2.4 Western印迹检测衰老相关蛋白表达变化
3 讨论



本文编号：3943706