尸食性蝇类的分子鉴别及其发育生物化学特征用于死后间隔时间推断的基础研究

发布时间：2021-02-08 02:09

　　本文针对当前法医昆虫学中尸食性蝇类的幼期不易鉴别,以及可用于死后间隔时间推断的日龄指标较为缺乏之现状,就尸食性蝇类幼期种类的分子鉴别与其生长发育过程中蛋白质、糖类和脂类以及贮藏蛋白等生化特征的变化进行了系统测定,进而分析这些变化规律用于蝇类日龄推断的可行性,获得下列结果: 1.杭州地区常见尸食性蝇类的序列分析 通过DNA的序列测定,对杭州地区常见的六种尸食性蝇类——巨尾阿丽蝇Aldrichina grahami（Aldrich）、大头金蝇Chrysomya megacephala（Fabricius）、丝光绿蝇Lucilia sericata（Meigen）、棕尾别麻蝇Boettchereisca peregrina（Robineau-Desvoidy）、肥须亚麻蝇Parasarcophaga crassipalpis（Macquart）、家蝇Musca domestica Linnaeus进行分子鉴定,在六个种类间成功的扩增到了mt DNA COⅡ基因的部分序列。DNA测序结果表明不同种类间的序列差异达到10%,而同一种类不同个体之间几乎没有差异,差异在1%以下。 2.双向凝胶电泳图... 

【文章来源】：浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：160 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

种尸食性蝇类初孵幼虫蛋白质组双向电泳图谱

图.224种尸食性蝇类初孵幼虫蛋白质组双向电泳点的分布比较A:肥须亚麻蝇:B:巨尾阿丽蝇;C:大头金蝇;O:棕尾别麻蝇Fig2.2ComParisonofsPotsdisrtibutionoftwo一dimensionalgelelectrophoresisfingeringmaPofrofursPeeiesofcarrion一breedingfliesneonatelvarae:A尸口尸‘心acrPoh口gaCr口，sPiarlsi;B:Adrlcihnia岁ahma几C:Chysro阴ylame字尤Pehaal:D:OBeCttherisea尸eerg了ina

猪肉的蛆虫体内检测到，而喂食了麦数的蛆虫体内则检测不到相应的目的片段。扩增到的片纯化后经测序后，与GneBnak上相应的序列进行了比对，序列相似性达到97%。cytb基因不仅能在嗦囊中检测到也能从整个虫体中检测到(图3.2)。当然图32也表明，前者的PCR产物比后者的PCR产物更明显。因此，在下面的试验中我们采用嗦囊作为我们研究的对象。.22离食期后PCR检测概率随时间的变化非线性回归曲线表明，随着巨尾阿丽蝇幼虫消化时间的延长cytb基因可检测到的概率随之下降(图3.3)。在这里改进的logistie曲线方程为:厂exp(a+b*x)/(1+exp(+ab*x))。。图3.3表明，几乎所有的样品在幼虫进入离食期12h内都能检测到。而且在恒温下，其最长可检测的时间范围从32℃的24h增加到16℃的42h(见图34)。3讨论昆虫学证据不仅可以用来推断死亡间隔时间，本文的结果表明还可以用来鉴定蝇蛆体内的脊椎动物。Campbosos等(2005)亦认为蛆虫体内的DNA检测是适合用于检测其食物来源的。序列测定的结果也显示了嗦囊或者蛆虫的PCR扩增与宿主DNA的PCR扩增结果是一致的，Wesll等(2001)的序列测定也与人类DNA相关靶标序列相符。然而图.32的结果却告诉我们


本文编号：3023201