猪生长激素抗独特型抗体的制备及其生物特性的研究

发布时间：2017-04-16 10:20

  本文关键词：猪生长激素抗独特型抗体的制备及其生物特性的研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】： 猪生长激素(porcine growth hormone，pGH)是猪垂体前叶分泌的长为191个氨基酸的单链多肽类激素。生长激素是调节机体正常生长和发育的主要激素之一，它促进氨基酸进入细胞以及RNA的生物合成，从而加速蛋白质的合成，不仅促进骨的生长，且影响许多组织的生长；GH促进脂肪的分解以及脂肪酸氧化供能，加速脂类的代谢，显著提高猪的生长速度、饲料报酬和瘦肉率。研制开发猪生长激素类饲料添加剂具有较高的商业价值和科研价值。 猪生长激素最早从猪的垂体组织中提取，不仅费时费工，而且产量有限，无法在生产中推广应用。随着科技发展，国外最早于1983年用大肠杆菌生产出pGH后，人们开始通过生物工程方法制备猪生长激素。用生物工程方法制备猪生长激素，涉及基因调控、表达及蛋白质分离纯化等多项技术。目前生物工程生产的猪生长激素由于蛋白质生物活性低、产量低、成本高、并且需连续、大剂量多次肌肉注射或皮下包埋等不足之处，限制了其应用。激素免疫学的兴起，使有目的的改变内分泌平衡并产生有意义的生理学效应成为可能，许多学者对此已进行了大量的实验研究，已经取得很大成功。 本实验采用纯化的猪生长激素单克隆抗体作为抗原，免疫山羊，获得羊抗猪生长激素抗独特型抗体，并对其免疫特性进行鉴定。还以异硫氰酸荧光素(FITC)标记所获得猪生长激素抗独特型抗体作为探针，使之与猪肝细胞上生长激素受体结合，应用共聚焦激光扫描显微镜，观察免疫荧光标记的猪生长激素抗独特型抗体在猪肝细胞的结合情况，对生长激素抗独特型抗体在结构上模拟生长激素的结合特性进行定位研究，第三，在小白鼠上验证其的促生长活性。研究结果发现，所获得猪生长激素抗独特型抗体具有与生长激素相似的免疫学特性。标记的生长激素抗独特型抗体能够与猪肝细胞膜生长激素受体特异性的结合。试验证明所获得的猪生长激素抗独特型抗体作为猪生长激素的模拟物在结构上存在着与猪生长激素相似性。且在小白鼠的促生长活性试验中证明猪生长激素抗独特型抗体作为猪生长激素的模拟物对小白鼠具有促生长活性。 本实验的研究结果为应用抗独特型抗体促进猪的生长提供了实验依据，也为进一步探讨免疫调控激素促生长作用的机理，研制开发安全有效的新型生长激素替代物奠定理论和技术基础。
【关键词】：猪生长激素 抗独特型抗体 免疫荧光 促生长 活性
【学位授予单位】：吉林农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2007
【分类号】：S852.4
【目录】：

• 摘要6-7
• Abstract7-8
• 前言8-15
• 一 猪生长激素的研究概况8-11
• 二 抗独特型抗体的研究概况11-15
• 实验一 猪生长激素抗独特型抗体(Ab_2)的制备和鉴定15-25
• 1 材料与方法15-19
• 1.1 材料15-16
• 1.2 方法16-19
• 2 结果与分析19-23
• 2.1 单克隆抗体腹水及培养上清效价的测定19-20
• 2.2 猪生长激素单克隆抗体的纯化结果20
• 2.3 羊抗猪生长激素单克隆抗体血清效价测定20
• 2.4 羊抗猪生长激素单抗血清纯化结果20-21
• 2.6 竞争抑制实验结果21-23
• 3 讨论23-24
• 4 小结24-25
• 实验二 猪生长激素抗独特型抗体(Ab_2)结构特性的研究25-31
• 1 材料与方法25-27
• 1.1 材料25
• 1.2 实验方法25-27
• 2 结果27-29
• 2.1 肝细胞的分离和培养结果27
• 2.2 激光共聚焦扫描显微镜观察肝细胞荧光染色结果27-29
• 3 讨论29-30
• 4 小结30-31
• 实验三 猪生长激素抗独特型抗体对小白鼠的促生长活性研究31-36
• 1 材料与方法31-32
• 1.1 动物与药品31
• 1.2 实验分组及处理31
• 1.3 统计分析31-32
• 2 结果32-35
• 2.1 各种处理对小鼠体重等项指标的影响32-33
• 2.2 各种处理后的小鼠各周体重的变化情况33-35
• 3 讨论35
• 4 小结35-36
• 结论36-37
• 参考文献37-42
• 附录42-45
• 致谢45-46
• 作者简历46

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  本文关键词：猪生长激素抗独特型抗体的制备及其生物特性的研究，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：310610