3D打印丝素蛋白-胶原支架与ADSCs构建组织工程脂肪的实验研究

发布时间:2021-07-27 07:25
  目的:对3D打印法制备的丝素蛋白-胶原支架的孔径、孔隙率、吸水溶胀率、力学性能、生物相容性、降解性进行表征,对比3D打印与冷冻干燥法制备的支架的区别;观察3D打印支架与ADSCs在体内能否成功构建组织工程脂肪。方法:1.3D打印与冷冻干燥法(FD)制备丝素蛋白-胶原支架,其丝素蛋白浓度为3.9%,胶原浓度为1.95%,二者混合比例为2:1。2.大体观察由丝素蛋白-胶原制备的3D打印支架(实验组)和FD支架(对照组)的外观,分别测量两组支架的孔隙率、吸水溶胀率、孔径、力学性能;分离提取脂肪间充质干细胞(ADSCs),将第3代ADSCs分别接种在两种支架材料上体外培养,使用CCK-8试剂检测细胞在450nm波长处OD值,即支架对细胞的毒性及与细胞的生物相容性,并在培养14天后,对细胞-支架复合物进行固定制样,扫描电镜观察细胞在两组支架材料上的黏附及伸展状态及细胞是否分泌基质。3.将两组ADSCs-支架复合物培养后植入大鼠皮下,于植入后2w、4w、6w观察支架变化,了解两组支架降解情况。并取植入材料做HE染色、Masson染色、免疫组织化学染色,了解炎症反应、纤维化程度及成脂情况。结果:1.... 

【文章来源】:兰州大学甘肃省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】:48 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

3D打印丝素蛋白-胶原支架与ADSCs构建组织工程脂肪的实验研究


脂肪组织碎块

胶原酶,脂肪组织,碎块,后下


加入胶原酶消化离心后下层

显微镜下,支架,扫描电镜观察,支架材料


显微镜下 ADSCs 形态学观察(×100)A:原代 ADSCs;B:3 天 ADSCs;C:7 天 ADSCsD:第 3 代 ADSCs Observation ofADSCs morphology by microscope(×100)A:The primaryADSCs;B:T3rd dayADSCs;C:The 7th dayADSCs;D :The 3rd generation ADSCs3D 支架材料 A:干燥支架大体外观;B:单纯支架扫描电镜观察 (×50);C:ADSCs-支架共培养后扫描电镜观察 (×2000)

【参考文献】:
期刊论文
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[4]膝关节韧带组织工程的研究进展[J]. 李豫皖,金瑛,熊华章,刘毅.  中国运动医学杂志. 2017(03)
[5]组织工程学在泌尿外科应用中的研究与进展[J]. 孙恒,赵战魁,孟琳,于红莲,孔庆胜.  中国组织工程研究. 2017(08)
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[7]脂肪干细胞成脂分化的研究进展[J]. 陈犹白,陈聪慧,Qixu Zhang,韩岩.  中国美容医学. 2016(04)
[8]3D打印生物材料的研究进展[J]. 毛旭艳,侯士峰.  济宁医学院学报. 2016(01)
[9]3D打印技术及在组织工程领域的研究进展[J]. 田冶,曾庆慧,胡相华,任雅清,何晓帆.  中国医疗器械信息. 2015(08)
[10]人脂肪干细胞的提取和鉴定[J]. 吴尉,梁芳,宋小琴,胡平安,刘敏.  中国组织工程研究. 2015(28)



本文编号:3305368

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